利用绿色合成的银纳米颗粒减轻酒石黄对日本鹌鹑（Coturnix coturnix japonica）引起的组织病理学和基因毒性效应

《Poultry Science》：Mitigation of Tartrazine Induced Histopathological and Genotoxic Effects in Coturnix coturnix japonica using Green Synthesized Silver Nanoparticles

　　萨姆拉·沙巴娜·纳兹 | 玛丽亚姆·法蒂玛 | 菲扎·阿巴斯 | 乌尔法特·扎赫拉 | 拉莎·阿洛奈赞 | 哈夫萨·赛义德 | 萨尼娅·萨蒂 | 里法特·乌拉·汗 | 阿拉·阿布达博斯 | 阿里·R·阿尔·苏莱曼 | 拉伊德·阿尔-阿蒂亚特 | 索海尔·艾哈迈德 | 易卜拉欣·A·阿尔希达里
巴基斯坦费萨拉巴德政府学院大学动物学系

**摘要**
银纳米颗粒（Ag-NPs）因其抗菌特性而在多个领域得到广泛应用；然而，其潜在的毒性仍是一个值得关注的问题。在本研究中，使用印楝提取物合成了Ag-NPs，并通过紫外-可见光谱（UV-Vis光谱）进行了检测。同时利用傅里叶变换红外光谱（FTIR）和X射线衍射（XRD）技术确认了其结构和化学性质。本研究旨在评估酒石黄对日本鹌鹑组织病理学和DNA损伤的影响。共选取336只1日龄的日本鹌鹑，分为7组进行实验：第1组作为对照组，仅喂食基础饲料；第2组接受10 mg/kg的低剂量酒石黄；第3组接受20 mg/kg的酒石黄；第4组同时接受低剂量酒石黄（10 mg/kg）和低剂量Ag-NPs（4 mg/kg）；第5组接受低剂量酒石黄和高剂量Ag-NPs（8 mg/kg）；第6组接受高剂量酒石黄和低剂量Ag-NPs；第7组接受高剂量酒石黄和高剂量Ag-NPs，每天通过口服灌胃给药，持续45天。实验结果表明，接受20 mg/kg酒石黄的鹌鹑表现出更严重的组织病理学变化和DNA损伤。这些结果表明，低剂量酒石黄和高剂量Ag-NPs组合（第5组）的效果接近对照组，说明Ag-NPs能有效减轻酒石黄带来的危害。

**引言**
纳米技术是指在纳米尺度（1–100 nm）上研究和开发材料的技术，能够制造出具有不同于传统材料独特物理化学性质的结构（Nile等人，2020；Akram等人，2025）。纳米技术涵盖了在纳米尺度上运行的实际应用，是一个整合了纳米科学、纳米化学、纳米物理学、纳米材料和纳米生物技术的多学科领域（Al-Gheffari等人，2024；Al-Suwailem等人，2024；Naz等人，2024）。纳米材料可以被设计成具有特定功能，使其成为医疗保健、农业、食品系统和环境管理等领域创新技术的宝贵工具（Madkour等人，2019；Rawat等人，2023；Bhushan等人，2017；?imsek等人，2025）。由于纳米材料具有较高的表面积与体积比和增强的反应性，它们在生物医学和毒理学应用中受到了越来越多的关注。
银纳米颗粒（Ag-NPs）因其强大的抗菌活性和良好的物理特性而受到广泛关注，被广泛应用于水净化、医疗设备和消毒剂中（Gong等人，2007；Rasool等人，2024）。由于其独特的物理化学性质，Ag-NPs被认为是生物医学领域最有前景的纳米材料之一（Sadan等人，2025）。它们已被研究作为抗菌剂、抗癌剂、疫苗佐剂和促进伤口愈合的物质（Xu等人，2020；Usman等人，2025）。然而，纳米颗粒的生物反应受合成方法和表面化学性质的影响很大，因此环保的生产策略至关重要。
近年来，环保型Ag-NPs的合成成为纳米技术的一个快速发展的领域。绿色合成化学涉及开发避免使用有毒试剂并减少环境污染的纳米颗粒合成工艺（Al-Khalaifah等人，2025a, 2025b；Nie等人，2023）。植物介导的合成方法是一种简单可靠的生物相容性纳米材料生产方式，同时符合绿色化学原则。许多植物提取物被用于Ag-NPs的合成（Al-Khalaifah等人，2025a, 2025b），其中印楝（Azadirachta indica）是一种具有抗菌、抗病毒、抗真菌和抗炎特性的药用植物（Khan等人，2022）。基于印楝的合成方法提高了纳米材料的可持续性并可能改善其生物相容性，尽管仍存在关于纳米颗粒毒性的担忧（Fatima等人，2025）。由于其广泛的治疗潜力，印楝被誉为“二十一世纪的树”（Kumar等人，2015）。
随着纳米技术的进步，与合成染料相关的环境和生物学问题也日益突出。工业化导致含有染料的废水污染环境，许多染料难以生物降解并对生态系统有害（Hegazy等人，2023）。酒石黄是一种广泛用于食品、药品和化妆品的偶氮染料，具有高溶解度和持久性，对人类和动物构成安全风险（Jodat等人，2014）。尽管已经探索了多种物理化学方法（如吸附、光催化降解、电化学氧化和电芬顿反应）来去除染料（Akbarzadeh等人，2023），但由于其持续广泛使用，暴露风险仍然存在（Abbas等人，2026）。越来越多的实验证据表明，酒石黄可能对动物模型产生生物毒性。哺乳动物研究显示，接触合成食品染料后会出现肝脏和肾脏组织变化（Shathi等人，2023）。鸟类研究也表明它们对酒石黄具有敏感性（El-Borm等人，2019）。El-Borm等人（2019）报告称，接触酒石黄和日落黄染料的鸡胚出现肝毒性和肾毒性；El-Borm等人（2020）发现鸟类胚胎的DNA受损，肝细胞和肾细胞周期受到干扰。这些发现强调了在禽类中进行进一步毒理学评估的必要性。
纳米颗粒还因其高吸附能力和催化性能而被研究用于环境染料去除（Marimuthu等人，2025）。银纳米颗粒具有光催化活性，能够降解多种染料，绿色合成的Ag-NPs在实验条件下可降解约55–60%的酒石黄（Khan等人，2023）。除了环境修复外，评估这些纳米颗粒是否能够减轻染料暴露引起的生物毒性也是一个新兴的研究方向。
日本鹌鹑因其体型小、繁殖速度快、适应性强以及在禽类生产中的重要性而被视为理想的实验模型（Abbas等人，2026）。它们在毒理学和营养学研究中的广泛应用使其适合评估与禽类科学和食品安全相关的健康风险和潜在保护措施。因此，本研究的目的是使用印楝提取物绿色合成银纳米颗粒，并评估其对日本鹌鹑中酒石黄诱导的毒性的保护作用。具体来说，本研究调查了酒石黄暴露引起的组织病理学变化和DNA损伤，并评估了印楝衍生的Ag-NPs是否能够以剂量依赖的方式减轻这些不良影响。

**材料与方法**
**绿色银纳米颗粒（Ag-NPs）的合成**
将叶子用去离子水清洗并在室温下风干后，用流动自来水冲洗表面以去除污垢和其他有机污染物。在一个250 mL的锥形烧瓶中加入50 mL去离子水，放入约15克切碎的叶子，然后在60°C的水浴中煮沸25分钟。冷却至室温后，通过Whatman滤纸过滤提取物，并在4°C下保存以备后续使用。另一个Erlenmeyer烧瓶中加入100 mL 1 mM硝酸银（AgNO3）溶液。在室温下将50 mL 1 mM硝酸银溶液与10 mL印楝提取物混合，并不断搅拌20分钟以生成Ag-NPs。将混合物置于黑暗环境中室温下保存，以防止硝酸银自氧化。溶液颜色从红色变为深棕色，表明银纳米颗粒（Ag-NPs）已生成，通过紫外-可见光谱确认了Ag-NPs的形成。24小时后，将溶液以2000 rpm的速度离心15分钟，所得沉淀物在100°C的烤箱中干燥24小时（Kumari等人，2022）。
使用紫外-可见分光光度计（Hitachi U-2800）对合成的Ag-NPs进行表征，该仪器测量300–600 nm范围内的吸光度（Ahmed等人，2016）。最大吸收波长（λmax）约为420 nm，符合球形银纳米颗粒的典型SPR带，进一步验证了纳米颗粒的形成。利用PerkinElmer傅里叶变换红外光谱（FTIR）技术识别稳定Ag-NPs的功能基团。在4 cm?1的分辨率下，测量400–4000 cm?1的光谱区域。FTIR分析显示了与蛋白质羰基相关的吸收峰，表明Ag-NPs可能被印楝提取物中的蛋白质包裹和稳定。使用X'Pert Pro衍射仪和Cu Kα射线进行X射线衍射（XRD）分析，以确定纳米颗粒的非晶结构和尺寸分布。扫描速度为10°/min。XRD结果证实了非晶结构（Ugwuoke，2023）。

**试验鸟类和研究方法**
从拉合尔兽医与动物科学大学（UVAS）的鸟类研究与培训中心（ART中心）购买了336只1日龄的日本鹌鹑。这些鹌鹑被小心运输并转移到费萨拉巴德政府学院的动物房。实验在政府学院大学动物学系的研究实验室进行，持续时间为45天。
鹌鹑在受控条件下适应10天，温度为20–25°C，光照时间为16小时/8小时黑暗，湿度为70%。所有鹌鹑在相同的温度、湿度和卫生条件下饲养，并得到适当的护理。鹌鹑可以自由摄取商业基础饲料（表1）和新鲜水。适应10天后，将它们随机分为7组，每组48只，每组重复6次。各组如下：第1组为对照组，仅喂食基础饲料；第2组接受低剂量酒石黄（10 mg/kg体重）；第3组接受高剂量酒石黄（20 mg/kg体重）；第4组同时接受低剂量酒石黄（10 mg/kg）和低剂量Ag-NPs（4 mg/kg体重）；第5组接受低剂量酒石黄和高剂量Ag-NPs（8 mg/kg体重）；第6组接受高剂量酒石黄和低剂量Ag-NPs（4 mg/kg体重）；第7组接受高剂量酒石黄和高剂量Ag-NPs（8 mg/kg体重）。所有鹌鹑均通过口服灌胃接受不同剂量的酒石黄和Ag-NPs。这些剂量水平基于先前的毒理学研究，并参考可接受的日摄入量（ADI）选择，以模拟超过正常饮食摄入量的亚慢性暴露情况，但有助于评估集约化禽类生产系统中的潜在生物风险（Abbas等人，2026）。酒石黄溶解在无菌蒸馏水中，绿色合成的Ag-NPs悬浮在同一溶剂中以确保处理的一致性。采用口服灌胃方法确保准确均匀地给予预定剂量，并减少因饲料摄入差异引起的变异。虽然这种方法不同于常规饲料添加方式，但它能够进行受控的毒理学评估，并更清晰地解释剂量依赖性的遗传毒性和组织病理学反应，从而提供与禽类健康和食品安全相关的机制见解（表2）。

**表1. 日本鹌鹑饲料的主要成分和营养成分**
| 成分 | 含量（%） |
|-----------------|-----------------|
| 黄玉米 | 49.25 |
| 大豆粉 | 32.18 |
| 淀粉 | 10.15 |
| 石灰石 | 6.50 |
| 二钙磷酸盐 | 1.16 |
| 盐（NaCl） | 0.30 |
| 紫花苜蓿叶粉 | 0.16 |
| 维生素和矿物质混合物 | 0.30 |
| 计算分析 | |
| ME, Kcal/kg | 2830 |
| 粗蛋白 | 22.63 |
| 粗纤维 | 2.21 |
| 乙醚提取物 | 2.19 |
| 钙 | 2.82 |
| 磷 | 0.33 |
| 甲硫氨酸+半胱氨酸 | 0.72 |
| 甲硫氨酸 | 0.44 |
| 赖氨酸 | 1.01 |
| 每千克维生素和矿物质混合物包含：10,000 IU视黄醇、3,500 IU胆钙化醇、35 IU生育酚、1.67 mg叶绿醌、1.67 mg硫胺素、2 mg核黄素、3.67 mg吡哆醇、0.012 mg氰钴胺、6.67 mg泛酸、16.7 mg烟酸、1.67 mg叶酸、0.07 mg生物素、400 mg氯化胆碱、0.03 mg硒、133.4 mg镁、90 mg锰、80 mg锌、25 mg铁、1.67 mg铜、0.8 mg碘。 |

**表2. 日本鹌鹑饲料的主要成分和营养成分**酒石黄和银纳米颗粒对鹌鹑DNA各参数的影响

参数 | 对照组 | Tz低剂量 | Tz高剂量 | HDTz低剂量 | LD AgNPs | LD AgNPs高剂量 | HDTz高剂量 | HD AgNPs | HDP值 |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| 头部长度（平均值±标准差） | 26.33 ± 1.15a | 5.00 ± 2.00de | 3.67 ± 1.15e | 10.33 ± 1.15c | 17.00 ± 0.11b | 7.67 ± 1.15cd | 9.00 ± 2.00c | 0.001??? |
| 尾部长度（平均值±标准差） | 3.33 ± 0.58b | 7.00 ± 2.00ab | 9.00 ± 1.00a | 4.67 ± 2.89ab | 3.00 ± 0.01b | 6.33 ± 0.58ab | 5.67 ± 2.08ab | 0.006?? |
| 彗星尾长度（平均值±标准差） | 29.66 ± 0.58a | 12.00 ± 0.00c | 12.67± 0.57c | 15.00 ± 1.73c | 20.00 ± 1.00b | 14.00 ± 1.00c | 14.67 ± 2.51c | 0.001??? |
| 头部DNA（平均值±标准差） | 99.04 ± 0.99a | 25.33 ± 1.59e | 11.39 ± 3.05f | 67.42 ± 2.09c | 93.44 ± 0.21b | 48.90 ± 0.88d | 66.21 ± 2.09c | 0.001??? |
| 尾部DNA（平均值±标准差） | 0.95 ± 0.99f | 74.67 ± 1.59b | 88.60 ± 3.05a | 32.57 ± 2.09d | 6.56 ± 0.11e | 51.09 ± 0.88c | 33.78 ± 2.09d | 0.001??? |
| TM（平均值±标准差） | 0.03± 0.03c | 4.49 ± 1.99ab | 7.12 ± 1.74a | 1.56 ± 1.07bc | 0.19± 0.01c | 2.05 ± 0.93bc | 2.18 ± 1.07bc | 0.001??? |
| OTM（平均值±标准差） | 0.13 ± 0.14b | 2.84 ± 2.22b | 5.90 ± 0.72a | 1.67 ± 0.34b | 0.54 ± 0.01b | 1.60 ± 0.96b | 1.87 ± 0.34b | 0.001??? |

注：
- Tz = 酒石黄；AgNPs = 银纳米颗粒；LD = 低剂量；HD = 高剂量
- ★★ = 高度显著；★ = 显著

**银纳米颗粒的表征**
本研究中使用的银纳米颗粒是根据Al-Khalaifah等人（2025a）描述的标准化程序合成并进行了物理化学表征。表征包括X射线衍射（XRD）、动态光散射（DLS）测定的流体动力学直径、多分散指数（PDI）和ζ电位，以确认纳米颗粒的结构特性、尺寸分布和稳定性。详细的表征数据已由Al-Khalaifah等人（2025a）先前报道，此处不再重复。

**血液样本采集**
在试验结束时（第45天），从每组6只鸟的肱静脉中抽取2-3毫升血液。所有样本均按照Khalid等人（2025）描述的方法存储在 lavender-topped 管中。血液样本在-20°C下保存。

**组织样本采集**
每组选取6只鸟进行人道屠宰，小心取出其器官并放入单独的容器中。所有样本均用福尔马林保存以供进一步分析。

**DNA损伤检测**
使用单细胞凝胶电泳（SCGE，也称为彗星试验）来评估酒石黄和银纳米颗粒暴露引起的DNA损伤。该程序按照Al-Khalaifah等人（2025a）描述的方案进行，但略有修改。简要来说，将细胞嵌入琼脂糖中，然后用冷裂解缓冲液（pH 10）裂解以去除细胞蛋白，随后在碱性条件下（pH > 13）进行20分钟的DNA解旋。电泳在碱性缓冲液中以25 V（≈0.8 V/cm）和300 mA的电流下进行20分钟，温度为4°C。电泳后，将载玻片中和、染色，并在荧光显微镜下观察。使用Casp_1.2.3b1软件对七个彗星参数进行量化：头部长度、尾部长度、总彗星长度、头部和尾部的DNA百分比、尾部矩和橄榄形尾部矩。

**组织病理学分析**
为了进行组织病理学评估，将肾脏、肝脏和心脏的部分组织保存在10%中性缓冲福尔马林中，并使用标准程序处理。固定后的组织用石蜡包埋，使用旋转切片机切成5-μm厚的切片，并用苏木精和伊红（H&E）染色。每个器官至少分析三个不同区域。组织病理学评估以盲法进行，评估者不知道处理组别，以减少偏见。损伤程度使用半定量评分系统进行分级（0 = 无，1 = 轻微，2 = 中度，3 = 重度）。此外，使用ImageJ软件对相关组织特征（包括细胞密度、绒毛高度和组织厚度）进行定量组织形态学分析。拍摄带有刻度的代表性显微照片以记录形态变化并展示每个处理组的典型损伤。

**统计分析**
使用SPSS软件（版本21）中的单因素方差分析（ANOVA）分析了酒石黄和AgNP补充剂对日本鹌鹑遗传毒性和组织病理学参数的影响。将笼子作为实验单位，因为处理是在笼子级别进行的，且每个笼子内的鸟共享相同的环境和管理条件。在ANOVA之前，使用Shapiro–Wilk检验检查数据的正态性，使用Levene检验检查方差的齐性。必要时，对数据进行对数转换以满足ANOVA假设。统计分析使用笼子平均值。使用Tukey的事后检验确定处理组均值之间的显著差异，并报告实际p值、效应大小（η2）和95%置信区间，以全面评估处理效果。统计显著性在p < 0.05时声明。

**结果**
**肝脏的组织病理学分析**
图表显示了对照组和不同组别（用酒石黄和绿色合成AgNPs处理）的日本鹌鹑肝脏的组织学变化。对照组（正常肝细胞、窦状空间、无坏死）保持了肝脏的正常形态和组织结构，由大尺寸的肝细胞（也称为多边形细胞）组成。高剂量酒石黄组表现出严重的肝脏损伤、肝窦状充血和坏死，窦状血管扩张且边界模糊。低剂量酒石黄和高剂量AgNPs组（Tz LD AgNPs HD）的细胞和血管正常，仅有少量坏死，细胞边界正常。损伤程度从高到低依次为：Tz HD > Tz LD > Tz HD AgNPs LD > Tz HD AgNPs HD > Tz LD AgNPs LD > Tz LD AgNPs HD > 对照组（图1、2、3、4、5）。

**彗星试验分析**
ANOVA用于检查不同剂量酒石黄和Ag-NPs处理组的所有彗星参数。LHead、LTail、LComet、HeadDNA、TailDNA、TM和OTM的平均值显示出显著差异（P < 0.05）。事后Tukey检验显示，高剂量酒石黄组（20mg/kg）的LTail（9.00 ± 1.00）和tailDNA（88.60 ± 3.05）值最高，表明损伤最严重。低剂量酒石黄和高剂量AgNPs组（Tz LD AgNPs HD）的LHead（17.00 ± 0.00）和headDNA（93.44 ± 0.00）值最高，表明损伤较轻。总体而言，不同剂量处理的鸟显示出不同的结果。损伤程度从高到低依次为：Tz HD > Tz LD > Tz HD AgNPs LD > Tz HD AgNPs HD > Tz LD AgNPs LD > Tz LD AgNPs HD > 对照组。

**讨论**
本研究重点关注使用从印楝提取物制成的银纳米颗粒作为新的、可持续的保护剂，以防止酒石黄对日本鹌鹑的遗传毒性以及结构和功能异常（Soleimani等人，2019）。最近的研究强调了来自65多种药用植物的绿色合成物的日益使用，突显了生物相容性和环保纳米材料在未来的生物医学应用中的重要性（Saeed等人，2023）。此外，表征结果证实银纳米颗粒已成功合成。通过X射线衍射分析、FTIR和紫外可见光谱确认了银的存在（Al-Khalaifah等人，2025a）。然而，重要的是要认识到银纳米颗粒具有双重生物学性质，因为先前的研究报道了其保护作用和潜在的毒性效应，这取决于剂量、暴露时间和生物系统。因此，对其保护作用的解释应谨慎进行。

根据本研究，酒石黄的摄入严重损害肝脏、肾脏和心脏的组织。潜在组织损伤的指标是血液中肝酶活性的升高。这些发现与先前将肝细胞损伤与肝脏功能改变联系起来的研究结果一致（Amin等人，2010）。肝脏是一个庞大而复杂的器官，在脂肪、蛋白质和碳水化合物的代谢中起着关键作用。整个酶系统有助于化学物质的合成和代谢。当肝脏受到干扰时，可能会有更多的物质释放到血液中，从而导致组织损伤和其他严重问题（Giannini等人，2005）。在本研究中，高剂量酒石黄处理的组别中肾脏组织受损更严重。酒石黄的摄入增加了肌酐和尿素水平，导致肾脏损伤（Azu等人，2010）。由于酒石黄的代谢会产生自由基并增加氧化应激，本研究中观察到的组织学变化可能是由于酒石黄对心脏组织的氧化损伤（Iroh等人，2020）。Uyota等人（2020）的研究显示SOD显著下降而MDA显著升高，这支持了这一观点。超氧化物歧化酶（SOD）是心脏中重要的抗氧化酶，可中和危险的超氧化物自由基，保护心脏组织免受氧化应激、炎症和纤维化等事件的损害。丙二醛（MDA）是氧化应激的关键指标，是脂质过氧化的副产物（自由基对细胞膜的损害），表明细胞受到有害活性氧（ROS）的损伤。血液中MDA水平的升高表明显著的氧化损伤，这与动脉粥样硬化、心力衰竭等多种疾病的不良结果相关（Zheng等人，2008）。需要注意的是，该研究未测量氧化应激生物标志物。因此，关于ROS、SOD或MDA的先前机制解释是推测性的。关于抗氧化活性和自由基清除的陈述已经进行了调整，以反映这一局限性。在本研究中，与同时使用酒石黄和绿色银纳米颗粒处理的组相比，高剂量酒石黄处理的组的心脏组织损伤更为严重，因为银纳米颗粒（AgNPs）可以减轻酒石黄造成的影响。然而，由于没有设置仅使用AgNPs的对照组，因此无法确定观察到的改善效果是否完全归因于AgNPs的保护作用，或者AgNPs的暴露本身是否也参与了生物反应。这代表了实验设计的一个重要局限性，现在也已得到了相应的承认。AgNPs的强抗氧化活性是本研究的主要结论之一。这些变化表明，AgNPs能够成功减少氧化应激并维持细胞的氧化还原平衡。参与纳米颗粒制备的植物化学成分可能促进了内源性防御机制，从而产生了这种抗氧化效应（Zhang等人，2019年）。来自不同植物来源的银纳米颗粒（如大蒜和洋葱皮提取物）已被证明具有类似的细胞保护和抗氧化特性（Ali等人，2019年）。在本研究中，低剂量酒石黄和高剂量AgNPs处理的组在肝脏、肾脏和心脏组织中的损伤较小，这归功于AgNPs的抗氧化和其他保护作用。尽管由于缺乏仅使用AgNPs的处理，无法完全区分因果关系和纳米颗粒的特定效应。肝脏、肾脏和心脏的组织病理学损伤程度依次为：Tz HD > Tz LD > Tz HD AgNPs LD > Tz HD AgNPs HD > Tz LD AgNPs LD > Tz LD AgNPs HD > 对照组。彗星试验被认为是食品添加剂遗传毒性的可靠生物标志物，以其对DNA断裂的敏感、快速和经济的检测而闻名。由于全血中含有有害污染物，因此选择了全血作为检测样本。由于酒石黄属于偶氮染料类食品色素，肠道菌群会将其分解为芳香胺，这些芳香胺会产生活性氧（ROS），而活性氧已知会对DNA造成损害（Bansal等人，2005年）。根据最近研究酒石黄和Ag-NPs遗传毒性的病理学研究，并通过彗星试验验证，暴露于酒石黄的样本中的DNA损伤明显比同时使用酒石黄和Ag-NPs处理的样本或对照组更为严重。关于人工色素的遗传毒性，结果表明，酒石黄确实会损害血液DNA（通过彗星试验测量）。酒石黄与核DNA的直接相互作用很可能是这种遗传毒性的原因（Himri等人，2012年）。绿色合成的银纳米颗粒与处理组中的DNA损伤减少有关；然而，这些发现应谨慎解读，认为它们可能表明了一种调节作用，而不是绝对的抗氧化保护。

**结论**
本研究提供了关于酒石黄在日本鹌鹑（Coturnix coturnix japonica）中的遗传毒性和组织病理效应的重要新信息。研究表明，与其他同时使用酒石黄和Ag-NPs处理的组相比，酒石黄会对身体的不同组织造成严重损伤并导致DNA损伤，因为作为抗氧化剂的绿色银纳米颗粒能够通过减轻酒石黄引起的效应来对抗其危害。未来应进一步研究酒石黄和Ag-NPs补充剂对鹌鹑健康的长期影响。评估成本效益、最佳剂量以及与其他膳食成分的相互作用将非常重要。

**资助**
不适用

**伦理声明**
本研究已获得巴基斯坦白沙瓦农业大学畜牧与兽医科学学院家禽科学系的伦理委员会批准，批准编号为L-452/AH/UAP，日期为2022年11月16日。

**数据可用性声明**
数据可应合理要求向通讯作者索取。

**未引用的参考文献**
Ahsan等人，2024年；Althumairy，2025年

**作者贡献声明**
Samra：监督、概念构思；Shabana Naz：方法学设计、实验实施；Maryam Fatima：实验方法、数据分析；Fiza Abbas：数据可视化、验证；Ulfat Zahra：实验实施、数据管理；Rasha Alonaizan：写作、审稿与编辑；Hafsa Saeed：数据分析；Sania Satti：数据可视化、验证、数据分析；Rifat Ullah Khan：写作、审稿与编辑、初稿撰写、数据可视化、实验实施；Ala Abudabos：写作、审稿与编辑、初稿撰写；Ali R. Al Sulaiman：写作、审稿与编辑；Raed Al-Atiyat：写作、审稿与编辑；Sohail Ahmad：资源获取、资金筹措；Ibrahim A. Alhidary：资源获取、资金筹措。