通过对单细胞RNA测序、转录组学和热蛋白组分析的整合研究，发现PLCG1是异丙金雀花素治疗类风湿性关节炎的有效靶点

《Cellular & Molecular Biology Letters》：Integrated analysis of single-cell RNA sequencing, transcriptomics, and thermal proteome profiling identifies PLCG1 as the therapeutic target of isopimpinellin in treating rheumatoid arthritis

　　

摘要

背景

异戊皮宁（ISOP）从Toddalia asiatica（L.） Lam中提取，被认为具有抗炎潜力。然而，ISOP对类风湿性关节炎（RA）的影响及其相关机制仍不清楚。

方法

我们使用胶原诱导的关节炎（CIA）大鼠模型评估了ISOP对RA的治疗效果。随后，通过结合体内大鼠滑膜组织的单细胞RNA测序和体外巨噬细胞的转录组分析，确定了ISOP的潜在作用机制。接着，我们利用分子对接、热蛋白组学分析、细胞热位移测定以及药物亲和力响应靶点稳定性等方法来识别ISOP的分子靶点。最后，我们验证了这些靶点，并在体外探讨了巨噬细胞与类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞（FLS）之间的相互作用。

结果

我们发现ISOP改善了CIA大鼠的病理变化。从机制上看，ISOP抑制了巨噬细胞的迁移和M1型巨噬细胞的极化，并下调了Spp1的表达。此外，ISOP还抑制了M1型巨噬细胞中的RAS/ERK通路。重要的是，PLCG1是ISOP的直接靶点。沉默PLCG1可以减弱ISOP对M1型巨噬细胞极化的抑制作用。另外，用ISOP处理的巨噬细胞的上清液减少了RA-FLS的增殖和活化。沉默PLCG1消除了ISOP在巨噬细胞-RA-FLS共培养系统中的调节作用。

结论

ISOP通过靶向PLCG1来抑制M1型巨噬细胞中SPP1的产生，从而发挥其抗RA作用。