粪肠球菌噬菌体vB_EfS_L1的生物学特性及基因组分析

《Archives of Microbiology》：Biological characteristics and genome analysis of Enterococcus faecalis phage vB_EfS_L1

肠球菌Ef-01的抗生素敏感性测试显示对6种敏感、4种中敏、5种耐药，其噬菌体vB_EfS_L1效价达4.0×10^11 PFU/mL，可裂解40%临床肠球菌（含多重耐药株），热稳定（-20~37℃），pH4~10活性，抗氯仿/乙醚，UV敏感，基因组无致病基因，证实安全性。

　　

摘要

本研究重点关注了粪肠球菌 Ef-01菌株的分离、鉴定及其特性分析，以及针对该菌株的噬菌体vB_EfS_L1的研究。粪肠球菌是从医院实验室样本中分离出来的，并通过PCR分析得到确认，其基因序列与粪肠球菌 ATCC 19433具有高度同源性（长度为1466 bp）。抗生素敏感性测试结果显示，Ef-01对包括环丙沙星和利奈唑胺在内的六种抗生素敏感，对四种抗生素具有中等敏感性，而对青霉素和头孢拉定等五种抗生素具有抗性。随后，从医院废水中分离出了噬菌体vB_EfS_L1，并通过多轮斑块纯化技术进行了纯化。当感染复数（MOI）为0.01时，该噬菌体的滴度最高，达到4.0×10^11 PFU/mL。宿主范围分析表明，vB_EfS_L1能够裂解40%的临床分离出的肠球菌菌株，其中包括多重耐药菌株，显示出中等但具有临床意义的特异性。进一步分析显示，vB_EfS_L1在-20至37°C的温度范围内具有优异的稳定性，但在80°C下被灭活；此外，它在pH 4–10的范围内保持活性，且在酸性条件下活性最强。该噬菌体对氯仿和醚具有抗性，但对SDS和蛋白酶K敏感；同时，它对紫外线敏感，长时间暴露会导致其滴度迅速下降。对vB_EfS_L1的基因组（长度为41,151 bp）进行分析后发现，其中包含与结构成分、DNA复制、宿主裂解和包装相关的基因。功能基因预测结果显示该噬菌体不含溶原性基因或与毒力相关的基因，从而确保了其用于潜在治疗应用的安全性。这些发现凸显了该噬菌体作为对抗粪肠球菌的治疗剂的潜力，为基于噬菌体的细菌感染干预措施的发展提供了依据。