《Med Mat》：Tissue Claudin 18.2 levels as a prognostic factor in gastric adenocarcinomas: A retrospective cohort study
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为解决胃腺癌诊断标志物不足、预后评估困难的问题，研究人员开展了Claudin 18.2（CLDN18.2）组织表达与临床病理特征及预后关联的研究。该研究通过ELISA检测112例患者和62例对照的CLDN18.2水平，发现癌组织中CLDN18.2显著升高（中位数2.385 ng/mL），且与幽门螺杆菌感染、低分化、转移正相关；ROC曲线下面积达0.956，诊断敏感性92.4%、特异性100%；多因素分析证实CLDN18.2是生存的独立预后因子。该研究为CLDN18.2作为胃腺癌诊断和预后靶点提供了有力证据。
胃癌至今仍是全球健康的重要威胁，每年导致数十万患者死亡。尽管已有CEA、CA19-9等血清肿瘤标志物用于辅助诊断，但其敏感性和特异性均不够理想，难以满足精准诊疗的需求。近年来，随着分子靶向治疗和免疫治疗的快速发展，寻找新的、高效的特异性生物标志物成为胃癌研究的热点之一。其中，紧密连接蛋白Claudin 18.2（CLDN18.2）因其在正常组织中表达受限，而在多种上皮源性肿瘤，尤其是胃腺癌中高度表达，被视为极具潜力的治疗靶点。然而，关于CLDN18.2在胃腺癌中的表达水平、与临床病理特征的关系及其预后价值，现有研究数据存在不一致，且缺乏与幽门螺杆菌（H pylori）感染等关键因素关联的系统评估。为此，来自伊斯坦布尔梅迪波尔大学的研究团队开展了一项回顾性队列研究，旨在系统评估组织CLDN18.2水平在胃腺癌诊断、预后预测以及与临床病理参数关联中的价值，相关成果发表在《Med Mat》上。
为开展此项研究，研究人员主要采用了以下几种关键技术方法：首先，研究设计为回顾性队列研究，严格遵循STROBE报告规范，纳入了2010年1月至2025年6月在伊斯坦布尔梅迪波尔大学医学院医院确诊的112例原发性胃腺癌患者作为病例组，并匹配了62例内镜检查结果为良性的患者作为对照组，所有样本收集于2023年12月之前。其次，研究人员使用酶联免疫吸附试验（ELISA）技术，对从每位患者采集的癌组织、距离肿瘤至少10厘米的正常黏膜组织（病例组）以及对照组患者的正常黏膜组织进行定量检测，测量其中的CLDN18.2蛋白浓度（单位：ng/mL）。该ELISA试剂盒采用间接捕获抗体夹心法原理，实验过程进行了严格的质控。最后，在数据分析方面，研究团队运用了包括Mann-Whitney U检验、Kruskal-Wallis检验、Spearman相关分析、Kaplan-Meier生存曲线、Log-rank检验、Cox比例风险回归模型以及受试者工作特征（ROC）曲线分析等多种统计方法，以全面评估CLDN18.2的表达差异、诊断效能、与临床参数的相关性及其预后价值。
研究结果
3.1. 患者人口统计学和临床特征
病例组包括112例胃腺癌患者，平均年龄63.4±14.6岁，其中男性占65.2%。肿瘤最常见于胃窦部（51.8%），多数为低分化腺癌（54.5%），有38.4%的患者存在远处转移。
3.2. Claudin 18.2表达分析
3.2.1. 组织表达水平
癌组织中CLDN18.2水平中位数为2.385 ng/mL，显著高于癌旁正常组织（1.349 ng/mL）和对照组正常组织（1.260 ng/mL）（P<0.001）。癌组织表达水平约为正常组织的2.19倍，所有患者（100%）的癌组织CLDN18.2均高于其自身正常组织。
3.2.2. 人口统计学分布
仅在对照组中发现女性CLDN18.2水平（1.326 ng/mL）略高于男性（1.215 ng/mL）（P=0.042），而在病例组的癌组织及正常组织中，未发现显著的性别或年龄组间表达差异。
3.3. 与临床病理参数的关联
CLDN18.2在癌组织中的表达与多个侵袭性临床特征显著相关：幽门螺杆菌阳性患者表达水平（2.540 ng/mL）高于阴性患者（1.950 ng/mL）（P=0.002）；弥漫型肿瘤表达最高（5.735 ng/mL）；低分化肿瘤表达（3.560 ng/mL）显著高于中、高分化肿瘤（P<0.001）；局部晚期患者表达水平（3.780 ng/mL）最高。
3.4. 表达变化分析
从正常组织到癌组织的CLDN18.2表达变化率，在存在转移的患者中（156.3%）显著高于无转移者（82.1%），在低分化肿瘤中（162.8%）也显著高于高分化肿瘤（72.4%）（P<0.001）。
3.5. 按幽门螺杆菌状态进行的亚组分析
在H pylori阳性患者中，CLDN18.2表达与肿瘤位置、分化程度和转移状态均显著相关（P<0.05）；而在H pylori阴性患者中，未发现与这些参数的显著关联。
3.6. 转移风险的多变量分析
多因素Logistic回归分析显示，CLDN18.2水平每升高1 ng/mL，转移风险增加4.82倍（95% CI: 2.13-10.89, P<0.001）。此外，男性性别和低分化也是转移的独立危险因素，而年龄增长是保护因素。
3.7. 生存分析
虽然按中位数（2.385 ng/mL）分组的Kaplan-Meier生存曲线未显示显著差异（log-rank P=0.417），但将CLDN18.2作为连续变量的Cox回归分析表明，它是患者生存的独立预后因素（风险比[HR]: 1.28, 95% CI: 1.09-1.51, P=0.003）。2.385?ng/mL) expression groups (log-rank P?=?.417); (B) patients at risk; (C) survival distribution; (D) multivariate Cox regression results. CI = confidence interval, HR = hazard ratio.">
3.8. 诊断效能
ROC曲线分析显示，CLDN18.2区分胃腺癌与非恶性胃组织的曲线下面积（AUC）为0.956（95% CI: 0.927-0.985）。在最佳临界值1.675 ng/mL时，诊断敏感性为92.4%，特异性高达100%。
结论与讨论
本研究通过定量ELISA方法证实，CLDN18.2在胃腺癌组织中特异性高表达，且与幽门螺杆菌感染、肿瘤低分化、转移等不良临床病理特征密切相关。研究发现，CLDN18.2不仅是一个具有高诊断效能（AUC 0.956）的生物标志物，其表达水平每增加1 ng/mL还会使转移风险升高近5倍。更重要的是，多因素Cox回归分析确立了CLDN18.2是影响患者生存的独立预后因素。这些结果从多个维度强化了CLDN18.2在胃腺癌诊疗中的核心价值：它既是可靠的诊断工具，也是预测疾病侵袭性和患者预后的有力指标，为其作为靶向治疗靶点（如已获批的药物Zolbetuximab）的应用提供了坚实的病理生物学依据。研究还特别揭示了幽门螺杆菌感染可能通过上调CLDN18.2表达参与胃癌进展，这为理解感染与癌症发展的分子联系提供了新视角。尽管研究存在单中心回顾性设计和缺乏免疫组化验证等局限性，但其系统性的定量分析为CLDN18.2在胃腺癌精准医疗中的应用铺平了道路，未来需要更多前瞻性、多中心研究来验证和细化其临床应用阈值。
