《Nature Communications》：VGLL4-driven TEAD4 multimerization orchestrates DNA binding and YAP recruitment
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Hippo通路如何精细调控转录？研究者聚焦VGLL4-TEAD4-YAP/TAZ互作，发现VGLL4可促进TEAD4多聚化增强DNA结合与序列特异性，并通过Tondu结构域数量实现YAP招募的“低促高抑”动态平衡，揭示转录因子动态组装新范式。
研究背景：Hippo通路的“指挥家”之谜
在细胞生长、组织稳态与器官发育的精密调控网络中，Hippo信号通路如同一支高度保守的“交响乐团”，其下游核心效应分子——哺乳动物中的TEAD1-4蛋白，则是关键的“指挥棒”。作为序列特异性转录因子，TEAD家族通过与辅助因子VGLL（Vestigial-like family）或YAP/TAZ（Yes-associated protein/Transcriptional co-activator with PDZ-binding motif）合作，调控基因表达，从而决定细胞的命运走向。
然而，长期以来学界对TEAD如何动态协调DNA结合与共激活因子招募的分子机制仍存模糊地带：单体TEAD与DNA的相互作用是否足以支撑稳定的转录复合体装配？不同共因子（如VGLL4与YAP）如何影响TEAD的多聚状态及其功能？这些问题的答案，关系到对组织再生、癌症发生（如Hippo通路异常导致的肿瘤增殖）等生理病理过程的深层理解。
关键技术与方法概览
研究团队采用荧光组合光镊（fluorescence-combined optical tweezers）实时追踪TEAD4与DNA的结合动力学；通过体外重构多组分系统，分析TEAD4多聚化对DNA驻留时间的影响；利用生化与细胞实验验证VGLL4双Tondu结构域对YAP招募的化学计量依赖效应。
研究结果
单体TEAD4的快速DNA结合与解离特性
通过单分子水平的光镊实验，研究发现单体TEAD4与其共有基序（consensus motifs）的结合速率显著高于非特异性DNA，但其解离速率快且与随机DNA相当。这表明单体形式的TEAD4虽具序列选择性，却难以独立维持长时间的DNA停留，暗示多聚化可能是稳定转录复合体的关键。
多聚化延长TEAD4的DNA停留时间并促进YAP募集
实验证实，TEAD4通过形成多聚体获得多个DNA结合位点，显著延长了其在DNA上的停留时间。更关键的是，这种多聚化架构为YAP的招募搭建了“平台”——多聚TEAD4不仅增强了DNA锚定能力，还提高了对YAP的亲和性，将短暂的DNA接触转化为稳定的转录启动复合物。
VGLL4与YAP双向促进TEAD4多聚化
出乎意料的是，研究揭示VGLL4与YAP均能诱导TEAD4多聚化，并在此过程中强化其DNA结合能力与序列特异性。这一发现打破了“共因子仅调节转录活性”的传统认知，将其角色扩展到“复合物组装支架”层面。
VGLL4双Tondu结构域的化学计量依赖效应
VGLL4独特的双Tondu结构域赋予其对YAP招募的精细化调控能力：当VGLL4:TEAD4摩尔比低时，VGLL4促进YAP向DNA结合型TEAD4的募集；而当比例升高时，则转为抑制。这种“量变引发质变”的开关效应，揭示了细胞内共因子浓度梯度对转录输出的动态调节。
结论与意义
本研究首次从动态单分子层面解析了VGLL4驱动TEAD4多聚化的分子机制，阐明了多聚化在延长转录因子DNA驻留时间、促进YAP招募中的核心作用。VGLL4通过双Tondu结构域实现的化学计量依赖调控，为理解Hippo通路在组织稳态（如肝脏再生、心脏发育）与疾病（如胃癌、乳腺癌中VGLL4/TEAD/YAP失衡）中的精准运作提供了新范式。该成果发表于《自然·通讯》（Nature Communications），不仅深化了对真核转录因子-DNA互作的动态认知，更为靶向Hippo通路的药物设计（如调控TEAD多聚状态干预肿瘤生长）开辟了新思路。
