《Journal of Marine Science and Engineering》：Occurrence of a New Apicomplexan Intracellular Parasite in the Digestive Gland of Bulla striata (Gastropoda: Cephalaspidea) from the South Coast of Portugal
Sónia Rocha and
Alexandre Lobo-da-Cunha
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本研究针对海洋无脊椎动物寄生虫多样性未被充分认识的现状，对采自葡萄牙南部的泡螺Bulla striata消化腺进行电镜观察与分子鉴定，发现一种隶属于鱼血球虫类群的新型顶复门寄生虫，首次揭示该谱系的超微结构特征，将宿主范围从鱼类扩展至腹足纲，为理解海洋寄生虫进化与生态提供了关键数据。
在浩瀚的海洋生物网络中，微小却极具杀伤力的寄生虫往往扮演着“隐形杀手”的角色。顶复门（Apicomplexa）作为一类单细胞真核生物，不仅包含了导致人类疟疾、弓形虫病等重大疾病的病原体，还广泛寄生于水生动物体内。然而，相较于陆生脊椎动物的寄生虫，海洋无脊椎动物中的顶复门物种被严重低估，它们的多样性、演化关系以及对生态系统的潜在影响仍笼罩在迷雾之中。尤其令人好奇的是，近年来新发现的鱼血球虫（ichthyocolids）——一类主要感染热带鱼类红细胞的寄生虫谱系，是否拥有更广泛的宿主范围？它们能否跨越物种屏障，入侵其他海洋生物？这些问题的答案，对于理解海洋寄生虫的传播路径与生态风险至关重要。
带着这一疑问，研究人员将目光投向了栖息于葡萄牙南部海岸的泡螺Bulla striata。这种头楣目（Cephalaspidea）的海生腹足纲软体动物，以其草食性和独特的化学防御机制闻名，是探索海洋寄生虫宿主多样性的理想对象。Sónia Rocha与Alexandre Lobo-da-Cunha团队在《Journal of Marine Science and Engineering》发表的研究，正是瞄准了这一空白领域。他们通过对B. striata消化腺组织的系统性微观与分子分析，意外捕捉到了一种前所未有的胞内寄生虫——这不仅是对新物种的描述，更是首次向科学界揭示了鱼血球虫谱系在非鱼类宿主中的存在，以及其早期发育阶段的精细结构。
为解开这一谜题，研究者采用了多学科交叉的策略。他们从葡萄牙Ria de Alvor河口潮间带手工采集B. striata活体标本，分离消化腺组织；通过光学显微镜与透射电镜（TEM）结合组织化学染色（如PAS反应检测多糖、四唑耦合反应定位蛋白），解析寄生虫的形态与亚细胞结构；同时提取感染组织的基因组DNA，利用特异性引物扩增18S rDNA片段，经测序后运用最大似然法（ML）与贝叶斯推断（BI）构建系统发育树，确定其分类地位。
3.1. 光学与电子显微镜观察
研究者在所有五只受检个体的消化腺细胞内，均发现了典型的顶复门寄生虫踪迹。这些微生物并非游离存在，而是被包裹在由宿主膜形成的寄生泡（parasitophorous vacuole）中，占据了细胞的大量空间。值得关注的是，此次观察到的均为无性繁殖阶段的裂殖体（meront）与裂殖子（merozoite），未见有性生殖期。
在光镜下，裂殖体内富含高碘酸希夫（PAS）反应强阳性的颗粒——这正是顶复门特有的能量储备物质淀粉样糖原（amylopectin）。此外，四唑耦合反应揭示了大量密集分布于细胞边缘的蛋白质阳性微粒体，暗示了活跃的代谢活动。
电镜图像则揭开了更深层的秘密。年轻的裂殖体拥有一个核仁显著的细胞核，胞质内充斥着电子透明的淀粉样糖原颗粒、脂滴、粗面内质网（RER）以及紧邻糖原排列的电子致密微粒体（microbody）。尤为有趣的是，部分微粒体呈现C形截面，仿佛“拥抱”着糖原颗粒，暗示二者可能存在直接的代谢协作。随着裂殖体成熟，细胞出现多核化现象，并被RER池紧密包围。最引人注目的结构，是在寄生泡膜外围发现的平滑膜管状网状系统（tubular reticulum），它像触手般延伸入宿主细胞质，显著增加了寄生泡的表面积，极可能用于增强寄生虫与宿主间的物质交换。
最终，裂殖体分裂产生成熟的裂殖子。这些长约7–8 μm、宽约2 μm的弯月形细胞，装备着完整的顶端复合体（apical complex）：包括用于附着宿主的杆状微线体（microneme）、参与入侵的棒状体（rhoptry）以及锥形结构（conoid）。这是其具备感染能力的铁证。
3.2. 分子与系统发育分析
基因层面的证据进一步锁定了它的身份。研究者成功获取了一段1453 bp的18S rDNA序列（GenBank登录号PX990216）。BLAST比对显示，它与已知的鱼血球虫序列相似度最高（96.9–98.5%），特别是感染鱼类Stegastes与Ophioblennius macclurei的物种。
系统发育树的拓扑结构清晰地将该寄生虫置于球虫（Coccidia）大类群中。它与珊瑚共生体（corallicolids）构成姐妹群，共同位于艾美耳球虫亚目（Eimeriorina）的基部。而本次发现的新种，稳稳地占据了鱼血球虫谱系的最基部分支。这意味着，它不仅是鱼血球虫家族的一员，更可能是该谱系演化早期分化出的一个独特分支。
综合显微与分子证据，研究者展开了深入的生物学探讨。首先，裂殖子阶段储存大量淀粉样糖原是一大反常特征。不同于弓形虫（Toxoplasma gondii）仅在休眠期积累能量，这种新寄生虫在活跃的感染期即囤积燃料，可能反映了其在营养充沛的消化细胞内的独特生存策略。其次，那些紧贴糖原的电子致密微粒体，被推测为罕见的糖酵解酶容器——糖酶体（glycosome）。虽然这在动基体目（kinetoplastids）中常见，但在顶复门中尚属首次疑似发现，暗示该寄生虫可能高度依赖糖酵解供能。此外，研究者未观察到典型的线粒体，这与某些退化代谢的顶复门物种相符。
关于其生活史，由于未发现配子生殖或孢子生殖阶段，研究者倾向于认为B. striata仅为中间宿主，真正的终末宿主（可能是鱼类或其他捕食者）尚未确定。尽管泡螺具有化学防御，不易被捕食，但其作为寄生虫“隐藏库”的可能性不容忽视。
这项研究的突破性在于双重重构：一是将鱼血球虫的宿主版图从脊椎动物拓展到了无脊椎腹足纲，证实了该类群在海洋生态中的广泛潜伏性；二是首次描绘了鱼血球虫裂殖阶段的超微结构图谱，特别是管状网络与疑似糖酶体的发现，刷新了对顶复门细胞生物学的认知。这为未来监测海洋经济贝类的寄生虫病害、评估气候变化下宿主-寄生虫互作的演变提供了珍贵的基线数据。
