摘要
Pseudomonas plecoglossicida 会导致日本鳗（Plecoglossus altivelis）发生细菌性出血性腹水，这是一种致命疾病，其特征是腹部肿胀、出血性腹水、多灶性器官出血以及组织病理学上的肝细胞坏死和炎症浸润。由于缺乏有效的治疗方法，这种疾病的死亡率非常高，对水产养殖业构成了严重威胁。鉴于 P. plecoglossicida 感染的严重致病机制（包括细菌定植、组织坏死和宿主免疫失调），迫切需要有效的治疗策略。通过筛选传统中药单体，我们发现从 Peganum harmala 种子中提取的哈明（harmine）是一种针对该病原体的有效成分。在体内实验中，哈明通过破坏细胞膜完整性（表现为膜通透性增加）和抑制生物膜形成表现出直接的杀菌作用。在鳗鱼感染模型中，哈明显著提高了宿主的存活率，减少了组织中的细菌负荷，并通过增强单核细胞/巨噬细胞的吞噬作用和杀菌能力来提升先天免疫力，同时抑制了促炎细胞因子的释放和细胞凋亡。为了确定哈明的作用分子靶点，我们采用了药物亲和力响应靶点稳定性（Drug Affinity Responsive Target Stability, DARTS）分析方法，并通过 PRDX6 基因敲低实验进行了功能验证。哈明通过破坏细胞膜完整性和抑制生物膜形成发挥杀菌作用。在鳗鱼感染模型中，哈明显著提高了宿主的存活率，减少了组织中的细菌负荷，并通过增强单核细胞/巨噬细胞系统及其杀菌能力来提升先天免疫力，同时抑制了促炎细胞因子的释放和细胞凋亡，后者可能是通过调节 PRDX6 介导的氧化应激和下游 caspase 信号通路实现的。DARTS 分析显示，哈明与过氧化物还原酶 6（PRDX6）结合，PRDX6 是一种具有过氧化物酶、磷脂酶 A2 和溶血磷脂酰胆碱酰转移酶活性的多功能酶。这种结合释放了 TNF 受体相关因子 6（TRAF6），促进了其向线粒体的转运，并使其与 ECSIT 信号整合复合物结合，从而增强了线粒体活性氧（mROS）的产生，增强了巨噬细胞对细菌的杀伤作用。这些发现表明哈明是一种有前景的治疗候选药物，可用于控制 P. plecoglossicida 感染，同时也凸显了天然产物在水产养殖医学中用于宿主免疫调节的价值。
