长期静态培养改变了A549细胞的脂质代谢和生物能量代谢能力 Ivana ?uri?ová, Lucia ?ofranková, Ale? Kvasni?ka, Miroslav Balá?, Ivana Fábryová, David Friedecky 以及 Mária Balá?ová

《International Journal of Molecular Sciences》：Long-Term Static Cultivation Alters Lipid Metabolism and Bioenergetic Capacity in A549 Cells Ivana ?uri?ová, Lucia ?ofranková, Ale? Kvasni?ka, Miroslav Balá?, Ivana Fábryová, David Friedecky and Mária Balá?ová

　　

摘要

A549细胞被广泛用作肺泡II型（ATII）上皮细胞的体外模型；然而，它们的表型和代谢状态对培养条件、细胞密度以及静态、非传代培养的持续时间非常敏感。在这里，我们研究了长时间静态培养如何影响A549细胞的脂质代谢、线粒体生物能量学和存活能力。A549细胞在DMEM或Ham’s F-12培养基中未进行传代培养，持续时间长达25天，并通过脂质分泌检测、靶向脂质组学、[¹⁴C]-乙酸掺入、Seahorse生物能量分析以及应激相关标记物的转录分析进行了研究。在培养初期，与表面活性剂相关的指标最高，第7天达到峰值，表现为ABCA3和SP-A的表达升高以及表面活性剂相关磷脂的最大分泌量。随着培养时间的延长和细胞密度的增加，细胞中的磷脂酰甘油水平逐渐下降，到第25天几乎检测不到，同时伴随着合成代谢脂质代谢的减少、氧气消耗的降低和糖酵解活性的减弱。这些变化与活性氧的增加、细胞内Ca²⁺水平的升高以及应激相关转录本（包括CASP1、IL1B和C3）表达的增加相吻合。后期阶段还伴随着线粒体呼吸的减少和存活能力的下降。总体而言，我们的研究结果表明，长时间静态培养会导致A549细胞的代谢重塑和生物能量能力的降低。