2022-2025年重配奥罗普切病毒对牲畜、野生动物及家养宿主的感染性研究

《Pathogens》：Susceptibility of Livestock, Wildlife, and Domestic Host Species Cells to the 2022–2025 Reassortant Oropouche Virus Lindsey M. Reister-Hendricks, Dane C. Jasperson, Jessica Gutierrez, Bethany L. McGregor and Stacey L. P. Scroggs

本研究针对奥罗普切病毒（OROV）在北美的潜在动物宿主范围不明的紧迫问题，通过评估牲畜、野生动物及家养动物（牛、羊、野牛、白尾鹿、麋鹿、猪、马、犬）细胞对重配株OROV240023的感染性，发现除马细胞外，该病毒能在所有测试细胞中有效复制，其中野牛、猪和犬细胞的易感性最高。该研究为北美地区针对OROV的可能动物宿主开展靶向监测与防控策略提供了关键线索。

　　

在2022年至2025年间，一种名为奥罗普切病毒（Oropouche virus, OROV）的病原体引发了一场前所未有的、跨越多个国家的疫情，首次蔓延至古巴等非传统流行区，并造成了首次有记录的死亡病例。这促使科学家们必须直面一个关键问题：这种病毒的威胁究竟有多大？特别是，除了人类，它是否会感染我们在北美熟悉的动物，从而构成新的公共卫生隐患？OROV是一种由库蠓传播的人畜共患病病毒，长期以来被认为主要在南美洲的雨林循环，与树懒和灵长类动物为伴。然而，有抗体证据表明，家畜和野生动物也可能暴露于该病毒。随着一种被称为OROV²⁴⁰⁰²³的新型重配毒株的出现，其传播能力显著增强，了解其潜在的动物宿主范围变得至关重要，这直接关系到能否在病毒入侵新地区（如美国）时，制定有效的监测和控制措施。本研究正是为了填补这一知识空白，首次系统评估了北美地区重要的牲畜、野生动物和宠物对OROV²⁴⁰⁰²³的易感性。

研究人员为开展此项研究，运用了几个关键技术方法。首先，建立了细胞感染模型，他们使用了从美国本土物种（包括牛、绵羊、美国野牛、白尾鹿、麋鹿、猪、马和犬）肺或肾组织中分离培养的原代或传代细胞系。其次，他们从2024年古巴旅行相关病例中分离并传代培养了重配毒株OROV²⁴⁰⁰²³，并在研究中采用了多周期病毒复制曲线实验，以多重感染指数（MOI）为1.0感染上述各种细胞。最后，通过空斑测定法来定量不同时间点的感染性病毒滴度，并使用反转录定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）检测病毒S节段RNA的拷贝数，以全面衡量病毒的复制效率。数据处理采用了重复测量方差分析（ANOVA）和曲线下面积（AUC）计算等方法。

3. Results

3.1. OROV²⁴⁰⁰²³在多种源于牲畜、野生动物和家养动物的细胞系中有效复制

研究人员通过感染性病毒滴度和病毒RNA拷贝数两个层面评估了OROV²⁴⁰⁰²³在8种不同动物细胞中的复制情况。实验发现，OROV²⁴⁰⁰²³能够在除马（Equus caballus）细胞外的其他所有测试细胞中复制。在病毒滴度方面，感染后48小时内，猪（Sus scrofa）和犬（Canis lupus familiaris）细胞产生的病毒滴度最高，均超过10⁶PFU/mL。野牛（Bison bison）细胞的病毒复制曲线在48小时内持续上升，平均滴度达7.4 × 10⁵PFU/mL。而白尾鹿（Odocoileus virginianus）、麋鹿（Cervus canadensis）、绵羊（Ovis aries）和牛（Bos taurus）细胞则表现出中等的病毒复制水平。在病毒RNA水平上，野牛和犬细胞中S节段RNA的增长趋势显著，从感染开始到48小时感染后，分别增加了1.74和1.5个log₁₀拷贝数/mL，印证了病毒在这些细胞中的活跃复制。

3.2. 对OROV²⁴⁰⁰²³感染的易感性具有物种依赖性

为了更综合地评估不同物种的相对易感性，研究人员比较了各物种病毒滴度的变化倍数，并计算了变化曲线的曲线下面积。基于曲线下面积的排序结果显示，易感性最高的物种是野牛，其次是猪和犬。猪和犬的平均曲线下面积值分别比野牛低70%和86%。其余物种（包括白尾鹿、麋鹿、绵羊和牛）的平均曲线下面积值则比野牛至少低93%。这一量化分析证实了不同物种细胞对病毒的易感性存在显著差异，野牛、猪和犬被认为是潜在的、风险最高的宿主候选者。

4. Discussion

该研究的核心结论在于，北美地区多种重要的农业、野生动物及伴侣动物（如野牛、猪、犬、牛、羊、白尾鹿、麋鹿）的细胞能够支持新型重配奥罗普切病毒（OROV²⁴⁰⁰²³）的复制，这表明这些物种在病毒引入北美后可能成为易感宿主。相比之下，马细胞不支持该病毒复制，这与之前未能从马、驴、骡中检测到OROV抗体的血清学调查结果一致，提示马可能不是OROV的易感宿主。然而，研究人员也谨慎指出，细胞水平的易感性不等同于动物个体水平的感染能力，需要后续的体内实验来验证病毒复制动态、致病性和免疫反应。该研究具有重要的现实意义。首先，它首次提供了OROV²⁴⁰⁰²³在多种北美代表性物种细胞中复制能力的直接证据，特别是野牛、猪、犬等被确定为高风险候选宿主，这为北美地区未来开展针对性的动物宿主监测指明了方向。其次，研究结果与南美洲已有的血清学证据（在犬、牛、羊、水牛中检出抗体）形成了补充和呼应，并将宿主范围的可能边界扩展到了北美的野牛、白尾鹿和麋鹿等物种，而这些物种在南美的调查中未被涵盖。最后，这项工作强调了随着全球化和病毒进化，像OROV这类虫媒病毒对全球动物健康和公共卫生构成的潜在威胁。通过识别潜在的动物宿主，该研究有助于兽医、畜牧业者、野生动物管理者和公共卫生官员在病毒真正暴发前，预先规划和实施针对特定宿主和媒介的疾病防控策略，从而为保护农业生产、野生动物种群和人类健康筑起一道预警防线。