角蟾属水城角蟾的分类地位与地理分布范围研究（无尾目，角蟾科）

《Biodiversity Data Journal》：The taxonomic status and range distribution of Boulenophrys shuichengensis (Anura, Megophryidae)

　　

摘要 水城角蟾（Boulenophrys shuichengensis，Tian & Sun, 1995）因模式产地野外记录稀少且缺乏分子数据，长期以来存在分类学争议。为解决这一问题，研究人员整合了分子、形态学与模式产地调查数据：从模式产地采集3只蝌蚪，从中国云南省威信县采集7只成年雄性个体。基于16S rRNA与细胞色素c氧化酶亚基I（COI）基因串联序列的系统发育分析显示，模式产地的蝌蚪与来自云南威信、贵州大方及重庆的标本聚为一个得到强烈支持的单系分支，且遗传分化不显著（0–0.3%）。形态学比较进一步表明，威信种群的成体与模式产地蝌蚪均与原物种描述一致。本研究首次提供了水城角蟾模式产地的验证性分子数据，澄清了其分类地位，并详细描述了其蝌蚪形态；确认云南威信为新分布记录，将该物种的分布范围向北扩展了约200公里；验证了贵州大方与重庆种群均为同种，表明其在云贵高原分布更广。系统发育分析显示，水城角蟾是尾突角蟾（B. caudoprocta）的姐妹种，二者共同构成B. boettgeri种组内的一个分支。

论文解读

水城角蟾（Boulenophrys shuichengensis）自1995年被描述以来，因模式产地位于贵州省六盘水市（原水城县）凤凰村，长期缺乏后续野外记录与分子证据，其分类地位与系统发育位置一直悬而未决。此前，该物种曾被归入角蟾属（Boulenophrys）并置于B. boettgeri种组，但因缺乏模式产地的基因数据，其与近缘种的界限及真实分布范围始终模糊。同时，已有文献中关于其是否具喉囊的形态描述存在矛盾，且对其生活史特征知之甚少。在此背景下，研究人员针对这一分类学“疑难物种”开展了综合研究，相关成果发表于《Biodiversity Data Journal》。

研究人员采用了多学科交叉的关键技术方法：在样本来源方面，于2023年9月在模式产地（贵州六盘水中山区凤凰街道）采集3只蝌蚪，于2024年6月在云南昭通威信县采集7只成年雄性角蟾；分子生物学层面，提取样本尾部或肝组织基因组DNA，扩增线粒体16S rRNA与COI基因片段并进行双向测序，所得序列与GenBank中77种角蟾的同源序列进行串联比对，采用贝叶斯推断（Bayesian Inference, BI）与最大似然法（Maximum Likelihood, ML）构建系统发育树，并以未校正遗传距离（p-distance）评估种内与种间分化；形态学层面，依据标准两栖动物测量规范对成体及蝌蚪进行精细形态测量与比较，结合原描述验证分类特征。

研究结果分为以下几个部分：

分类单元处理（Taxon treatments）

研究人员详细记录了所有研究标本的采集信息与凭证编号，包括模式产地蝌蚪与威信种群成体，所有标本保存于南京师范大学两栖动物博物馆（NNU）。

形态描述（Morphological description）

成体雄性吻肛长（SVL）为66.7–89.0毫米，头部长宽相近，吻端钝圆，鼻孔侧位，上眼睑具显著角状突，鼓膜明显，无犁骨齿，舌心形。指序为II < I < IV < III，趾序为I < II < V < III < IV，趾间具微蹼。背部皮肤粗糙，具“V”形腺褶与断续背外侧脊，腹面光滑。雄性无婚垫、婚刺及声囊。生活时背面黄褐色，眼间具深褐色三角斑，腹面具黑白斑驳。蝌蚪处于戈斯纳（Gosner）31–35期，总长约37.2–40.6毫米，体纤细浅褐，口部呈菱形漏斗状具辐射状乳突，泄殖腔管中位开口，尾肌发达，尾尖钝圆且具棕黑斑点。

分布（Distribution）

水城角蟾目前分布于云南威信县海拔约1400米的山区溪流附近，生境为亚热带常绿阔叶林与竹林，与威宁拟髭蟾（Leptobrachella weixinensis）等同域分布。模式产地位于海拔约1835–1900米的石灰岩喀斯特溪流，生境湿润多雨，与镇海林蛙（Odorrana grahami）、华西蟾蜍（Bufo andrewsi）等共存。尽管多次调查，模式产地仍未发现成体。

分析结果（Analysis）

基于16S rRNA（537 bp）与COI（561 bp）的联合矩阵（共1098 bp）构建的系统发育树显示，所有角蟾样本形成强支持单系群（BI = 1.00，ML = 98）。水城角蟾各地理种群（模式产地蝌蚪、威信、大方、重庆）聚为独立分支（BS = 100；BPP = 0.99），种内遗传分化仅为0–0.3%。该分支与尾突角蟾互为姐妹种（BS = 94；BPP = 0.81），二者遗传距离为3.4%，且同属B. boettgeri种组。形态上，威信成体与模式产地蝌蚪均与原描述完全一致。

讨论与结论

本研究填补了水城角蟾长达数十年的分类学空白。首先，通过模式产地蝌蚪与跨种群分子数据的整合，明确了威信种群确为该物种在云南省的新记录，将分布北界推进约200公里，证实其并非模式产地特有种，而是广泛分布于云贵高原，暗示在滇东北至黔西的未调查山区可能存在更多隐存种群。其次，解决了历史形态描述的矛盾：经解剖验证，雄性确实无声囊，与原再描述一致，纠正了最初的错误记录。此外，系统发育分析支持其与尾突角蟾的近缘关系，并巩固了其在B. boettgeri种组内的分类位置。研究还指出，由于该物种雄性缺乏第二性征且无鸣叫，野外识别与监测难度极大，未来需在繁殖季深入调查其生活史，特别是其与洞穴水环境的潜在关联，为这一罕见两栖类的保护提供科学依据。