《Nature Communications》：Discovery of a novel envelope protein derived from simian retrovirus 2 for pseudotyping retroviral vectors used for production of CAR immune cells
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为改进CAR-T/NK细胞制备效率，研究人员开发了一种基于猿猴逆转录病毒2型（SRV2）假型的逆转录病毒载体。研究发现，该SRV2 RV在T细胞和NK细胞中的基因转导效率优于RD114 RV和VSV-G LV，且能产生具有显著抗癌活性的免疫细胞。该研究为CAR免疫细胞的高效生产提供了新的工具平台。
在当今的肿瘤免疫治疗领域，基于嵌合抗原受体（Chimeric Antigen Receptor, CAR）的T细胞和自然杀伤（Natural Killer, NK）细胞疗法展现了令人振奋的潜力，为许多难治性癌症患者带来了新希望。然而，要将实验室的突破转化为病床旁的利器，一个关键而棘手的“瓶颈”横亘在科学家面前：如何高效、稳定地将承载着“战斗指令”的CAR基因递送到原代免疫细胞（特别是T细胞和NK细胞）中。这就像是要给一支精锐部队装备上最先进的智能武器，但输送武器的通道却效率低下、损耗巨大。目前，常用的病毒载体，如带有猫内源性逆转录病毒（RD114）包膜的假型逆转录病毒（RD114 RV），或带有水泡性口炎病毒G蛋白（VSV-G）假型的慢病毒（VSV-G LV），在转导某些免疫细胞，尤其是NK细胞时，效率往往不尽如人意，限制了治疗产品的产量和质量。因此，探索和开发新型、高效的病毒载体系统，是推动CAR免疫细胞疗法走向更广泛应用的核心挑战之一。
为了攻克这一难题，一项发表于《自然-通讯》（Nature Communications）的研究带来了一项创新突破。研究人员将目光投向了猿猴逆转录病毒（Simian Retrovirus, SRV），旨在发掘其包膜蛋白用于假型病毒载体的潜力，以构建出基因转导效率更高的新型工具，从而优化CAR免疫细胞的生产流程。本研究运用的关键技术方法包括：利用不同来源的SRV包膜蛋白（ENV）构建假型逆转录病毒和慢病毒载体；在体外评估这些载体对人原代T细胞和NK细胞的基因转导效率，并与RD114 RV、VSV-G LV等现有载体进行对比；利用绿色荧光蛋白（GFP）或CAR基因转导成功的免疫细胞，在体外和体内（小鼠异种移植瘤模型）系统评估其增殖能力、细胞因子分泌以及对肿瘤细胞的杀伤活性。
研究结果层层揭示了新型载体的优越特性。首先，在“筛选高效转导免疫细胞的SRV假型病毒”部分，研究人员测试了多种SRV包膜蛋白。结果发现，在所有测试的SRV假型中，只有基于猿猴逆转录病毒2型（SRV2）包膜的假型逆转录病毒（SRV2 RV）能够成功将基因转导至人原代T细胞和NK细胞中。与之形成鲜明对比的是，即便使用相同的SRV2包膜蛋白，当它被用来假型慢病毒（LV）载体时，却完全无法介导基因进入T细胞。这提示，高效的基因递送不仅取决于包膜蛋白本身，还与病毒载体的核心（逆转录病毒 vs. 慢病毒）特性密切相关。
随后，在“SRV2 RV在T细胞和NK细胞中展现出卓越的转导效率”部分，研究通过定量比较证实，无论是转导T细胞还是NK细胞，SRV2 RV的表现都显著优于传统的RD114 RV。更重要的是，在难以转导的NK细胞中，SRV2 RV的效率更是大幅超越常用的VSV-G LV。这表明SRV2 RV在攻克原代免疫细胞，尤其是NK细胞转导难题上具有独特优势。
那么，经此高效工具改造的免疫细胞，其“战斗力”如何呢？在“利用SRV2 RV生产的CAR-T和CAR-NK细胞具有强大的抗肿瘤活性”部分，研究人员用SRV2 RV分别制备了靶向特定肿瘤抗原的CAR-T细胞和CAR-NK细胞。体外实验显示，这些细胞能有效识别并杀伤表达相应抗原的肿瘤细胞，并分泌高水平的干扰素-γ（IFN-γ）等效应细胞因子。进一步的动物体内实验表明，与用RD114 RV制备的CAR-T细胞相比，用SRV2 RV制备的CAR-T细胞在荷瘤小鼠模型中展现了更强、更持久的肿瘤抑制效果，显著延长了小鼠的生存期。同样，用SRV2 RV制备的CAR-NK细胞也表现出了显著的体内抗肿瘤活性。
综上所述，本研究的结论明确而有力：研究人员成功发现并验证了源自猿猴逆转录病毒2型（SRV2）的包膜蛋白可用于构建一种新型的假型逆转录病毒载体（SRV2 RV）。该载体系统在人原代T细胞和NK细胞中实现了超越现有主流工具（RD114 RV和VSV-G LV）的高效基因转导。利用此平台生产的CAR-T和CAR-NK细胞，在体外和体内模型中均证明了其强大的抗肿瘤功能。这项研究的核心意义在于，它为解决CAR免疫细胞制造过程中的关键效率难题提供了一个高性能、有前景的新工具（SRV2 RV）。这项创新不仅有望提升CAR-T/NK细胞治疗产品的产量和质量，降低生产成本，也为未来开发更高效的基因和细胞治疗载体开辟了新的思路和方向，对推动整个肿瘤免疫治疗领域的发展具有重要的实际应用价值。
