利用限制性内切酶介导的反转录多重交叉置换扩增技术，实现对柯萨奇病毒A16的高度敏感和快速检测

《BMC Microbiology》：Highly sensitive and rapid determination of Coxsackievirus A16 using restriction endonuclease‐mediated reverse transcription multiple cross displacement amplification

　　

摘要

背景

柯萨奇病毒A16（CVA16）是人类手足口病的主要致病因子，对婴儿和幼儿的健康造成严重影响。由于目前尚无针对CVA16的有效抗病毒药物和疫苗，因此需要一种具有高灵敏度、高特异性和快速响应能力的诊断策略来预防和管理CVA16感染。

结果

本研究开发了一种新型分子诊断方法，将实时荧光技术与逆转录多重交叉置换扩增（RT-MCDA）技术相结合，用于灵敏、快速且特异性地检测CVA16（该方法称为CVA16-E-RT-MCDA）。为了构建该检测系统，成功设计了一组针对CVA16 VP1基因的特异性引物，并确定其最佳反应条件为63℃下孵育35分钟。CVA16-E-RT-MCDA检测方法的检测限为每微升14个拷贝（相当于每次反应约70个拷贝的CVA16 RNA模板）。该检测方法具有较高的特异性和抗干扰能力。通过使用疑似CVA16感染患者的临床样本，迅速验证了CVA16-E-RT-MCDA方法的可行性。

结论

本研究建立的CVA16-E-RT-MCDA检测方法在CVA16的检测方面表现出高灵敏度、高特异性和快速性，使其成为临床应用中一种有前景的诊断工具。