针灸通过抑制WNK-SPAK-NKCC1信号通路的激活，改善了脑出血（ICH）大鼠的神经功能

《Journal of Molecular Histology》：Acupuncture improves neurological function in ICH rats via suppression of WNK-SPAK-NKCC1 signaling activation

　　

摘要

WNK3-SPAK-NKCC1信号通路与脑损伤的发病机制有关。本研究的目的是探讨该通路在脑内出血（ICH）中的作用，并评估针灸调节其活性的治疗潜力。共有210只Sprague Dawley大鼠被随机分配到实验组中。除假手术组外，所有组均通过自体血液注射诱导脑内出血。在百会（GV20）和曲鬓（GB7）穴位进行点对点针灸治疗。利用Western blotting、免疫组化、免疫荧光共定位和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测WNK3-SPAK-NKCC1通路中的蛋白质表达水平，以及血肿周围区域的炎症和凋亡标志物。通过测定脑水分含量、苏木精-伊红染色结果和神经功能评分来评估组织病理变化和功能结果。针灸显著改善了ICH大鼠的神经功能，减轻了脑水肿，并减少了血肿周围的病理损伤，在所有观察时间点均显示出这种效果。值得注意的是，连续进行七次针灸治疗后治疗效果最为明显。对WNK3和切割型caspase-3表达的时间进程分析及相关性分析表明，针灸的神经保护作用可能与WNK3介导的凋亡机制有关。基于这些发现，第7天被确定为进一步探讨机制的最佳时间点。在该时间点，持续针灸治疗显著改善了神经功能并降低了脑水分含量。此外，WNK3、磷酸化SPAK和NKCC1、TNF-α以及切割型caspase-3的表达水平显著降低，同时NeuN/TUNEL共定位也减少（p<0.05），这表明针灸可能通过抑制WNK3-SPAK-NKCC1信号通路发挥神经保护作用。针灸可能通过抑制WNK3-SPAK-NKCC1信号通路的激活来减轻ICH后的脑损伤，从而降低脑水肿、炎症反应和神经元凋亡。

WNK3-SPAK-NKCC1信号通路与脑损伤的发病机制有关。本研究的目的是探讨该通路在脑内出血（ICH）中的作用，并评估针灸调节其活性的治疗潜力。共有210只Sprague Dawley大鼠被随机分配到实验组中。除假手术组外，所有组均通过自体血液注射诱导脑内出血（ICH）。在百会（GV20）和曲鬓（GB7）穴位进行点对点针灸治疗。利用Western blotting、免疫组化、免疫荧光共定位和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测WNK3-SPAK-NKCC1通路中的蛋白质表达水平，以及血肿周围区域的炎症和凋亡标志物。通过测定脑水分含量、苏木精-伊红染色结果和神经功能评分来评估组织病理变化和功能结果。针灸显著改善了ICH大鼠的神经功能，减轻了脑水肿，并减少了血肿周围的病理损伤，在所有观察时间点均显示出这种效果。值得注意的是，连续进行七次针灸治疗后治疗效果最为明显。对WNK3和切割型caspase-3表达的时间进程分析及相关性分析表明，针灸的神经保护作用可能与WNK3介导的凋亡机制有关。基于这些发现，第7天被确定为进一步探讨机制的最佳时间点。在该时间点，持续针灸治疗显著改善了神经功能并降低了脑水分含量。此外，WNK3、磷酸化SPAK和NKCC1、TNF-α以及切割型caspase-3的表达水平显著降低，同时NeuN/TUNEL共定位也减少（p<0.05），这表明针灸可能通过抑制WNK3-SPAK-NKCC1信号通路发挥神经保护作用。针灸可能通过抑制WNK3-SPAK-NKCC1信号通路的激活来减轻ICH后的脑损伤，从而降低脑水肿、炎症反应和神经元凋亡。