mGluR6的N-糖基化调节受体细胞表面的转运、G蛋白偶联以及与突触黏附分子的相互作用

《Journal of Molecular Neuroscience》：N-Glycosylation of mGluR6 Modulates Receptor Cell-Surface Transport, G-Protein Coupling, and Interactions With Synaptic Adhesion Molecules

　　

摘要

代谢型谷氨酸受体6（mGluR6）主要表达在视网膜的ON型双极细胞中。mGluR6的N端胞外域（ECD）参与配体结合，并且还参与mGluR6在细胞表面的定位以及跨突触细胞黏附复合物的形成。我们利用表达具有天冬酰胺到谷氨酰胺（N到Q）替换的ECD突变的293T细胞，研究了mGluR6 ECD中的N-糖基化是否参与调节受体在细胞表面的运输、G蛋白偶联以及与Elfn1和Lrit1的相互作用。研究结果表明，mGluR6在ECD中的天冬酰胺残基N290、N445、N473和N561处发生N-糖基化，同时阻断这些位点的N-糖基化会降低细胞内的mGluR6水平。此外，N290Q和N445Q突变会降低mGluR6在细胞表面的表达量，而N473Q和N561Q突变则没有这种效应；同时，每个位点的N到Q替换都会一致性地损害谷氨酸诱导的G蛋白介导的反应。我们还发现，mGluR6在体外可以与Elfn1结合，并在共转染的细胞中与Lrit1共免疫沉淀。N445Q突变会抑制mGluR6与Elfn1的相互作用，而N473Q和N561Q突变则会促进这种相互作用；N290Q突变则会促进mGluR6与Lrit1的相互作用，而N561Q突变则会抑制这种相互作用。综合这些结果表明，每个N-糖基化位点都对有效的G蛋白偶联有贡献，同时这些位点还以不同的方式参与调节受体在细胞表面的运输以及与Elfn1和Lrit1的黏附复合物的形成。因此，突触受体的N-糖基化可能在调节跨突触信号传递中发挥作用，从而影响信号传输的调节。

图形摘要

此图像的替代文本可能是由AI生成的。

代谢型谷氨酸受体6（mGluR6）主要表达在视网膜的ON型双极细胞中。mGluR6的N端胞外域（ECD）参与配体结合，并且还参与mGluR6在细胞表面的定位以及跨突触细胞黏附复合物的形成。我们利用表达具有天冬酰胺到谷氨酰胺（N到Q）替换的ECD突变的293T细胞，研究了mGluR6 ECD中的N-糖基化是否参与调节受体在细胞表面的运输、G蛋白偶联以及与Elfn1和Lrit1的相互作用。研究结果表明，mGluR6在ECD中的天冬酰胺残基N290、N445、N473和N561处发生N-糖基化，同时阻断这些位点的N-糖基化会降低细胞内的mGluR6水平。此外，N290Q和N445Q突变会降低mGluR6在细胞表面的表达量，而N473Q和N561Q突变则没有这种效应；同时，每个位点的N到Q替换都会一致性地损害谷氨酸诱导的G蛋白介导的反应。我们还发现，mGluR6在体外可以与Elfn1结合，并在共转染的细胞中与Lrit1共免疫沉淀。N445Q突变会抑制mGluR6与Elfn1的相互作用，而N473Q和N561Q突变则会促进这种相互作用；N290Q突变则会促进mGluR6与Lrit1的相互作用，而N561Q突变则会抑制这种相互作用。综合这些结果表明，每个N-糖基化位点都对有效的G蛋白偶联有贡献，同时这些位点还以不同的方式参与调节受体在细胞表面的运输以及与Elfn1和Lrit1的黏附复合物的形成。因此，突触受体的N-糖基化可能在调节跨突触信号传递中发挥作用，从而影响信号传输的调节。

图形摘要

此图像的替代文本可能是由AI生成的。