PLAUR通过促进中性粒细胞介导的血脑屏障破坏以及重塑小胶质细胞的代谢，加剧了糖尿病缺血性中风中的神经炎症

《NeuroMolecular Medicine》：PLAUR Exacerbates Neuroinflammation in Diabetic Ischemic Stroke by Driving Neutrophil-Mediated Blood-Brain Barrier Disruption and Reprogramming Microglial Metabolism

　　

摘要

糖尿病缺血性中风会导致更严重的脑损伤。虽然尿激酶型纤溶酶原激活剂受体（PLAUR）与炎症和细胞迁移有关，但其在糖尿病中风中的确切作用仍不清楚。本研究采用了链脲佐菌素诱导的糖尿病tMCAO小鼠模型来模拟糖尿病缺血性中风。通过微阵列、Western blot和免疫荧光技术分析了小鼠脑组织中的PLAUR表达情况。使用RT-qPCR检测了内皮细胞（bEnd.3）中的PLAUR mRNA表达。我们评估了脑梗死体积、脑水分含量、神经功能缺损以及血脑屏障（BBB）的完整性。在体内和体外研究了中性粒细胞浸润（流式细胞术）、炎症介质、小胶质细胞极化以及代谢重编程（糖酵解蛋白、ECAR/OCR）。为了验证中性粒细胞是否对PLAUR介导的损伤至关重要，我们使用抗Ly6G抗体单独或联合PLAUR敲低实验进行了中性粒细胞耗竭实验。还检测了中性粒细胞胞外陷阱（NET）的形成（CitH3表达）及其对内皮通透性和小胶质细胞极化的影响。在糖尿病中风小鼠的大脑中，PLAUR表达显著上调，尤其是在小胶质细胞中。PLAUR敲低导致脑梗死体积减小、功能恢复改善，并通过恢复紧密连接蛋白来维持BBB的完整性。PLAUR敲低与中性粒细胞浸润减少、促炎介质（MPO、MMP3）降低以及促炎型M1小胶质细胞极化减弱相关。PLAUR沉默也在体内和分离的中性粒细胞中减少了NETosis。单独耗竭中性粒细胞显著减少了脑梗死体积、改善了神经功能结果，并恢复了紧密连接蛋白；值得注意的是，当中性粒细胞已被耗竭时，PLAUR敲低并未带来额外益处，这表明中性粒细胞是PLAUR介导损伤的重要下游效应器。此外，PLAUR敲低逆转了小胶质细胞的糖酵解转变。PLAUR在糖尿病缺血性中风中上调，其敲低与神经炎症减轻、BBB完整性保持、中性粒细胞浸润减少、NETosis减弱以及小胶质细胞极化和代谢改变相关。因此，靶向PLAUR是一种有前景的治疗策略，可用于减轻糖尿病中风中的脑损伤。