胰蛋白酶肽图谱技术在IgG4双特异性抗体中用于羟基赖氨酸修饰定量分析的开发及其影响因素的研究

《Journal of Chromatography B》：Development of trypsin peptide mapping for hydroxylysine modification quantification in an IgG4 bispecific antibody and investigation of influencing factors

　　

应段|张志琳|陈月|秦国宏|王攀|徐丹

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  首次在IgG4双特异性抗体HC2区域（XKG基序）中检测到羟赖氨酸。
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  羟赖氨酸会导致约81%的胰蛋白酶切割失败，这一现象容易被忽视，从而导致对修饰程度的低估。
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  优化胰蛋白酶消化方法后，切割失败的比例降至1%以下，从而能够准确量化羟赖氨酸的含量。
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  上游细胞培养过程会影响羟赖氨酸的含量；而下游的纯化过程和储存条件则不会对其产生影响。