在STZ小鼠模型中，糖尿病视网膜病变患者的凝血酶水平升高，而通过特定抑制剂PARIN5抑制凝血酶可以改善视网膜功能

《Scientific Reports》：Thrombin is increased in diabetic retinal pathology in the STZ mice model, and its attenuation by a specific inhibitor, PARIN5, is associated with preserved function

　　

摘要

糖尿病视网膜病变（DR）是工作年龄成年人视力丧失的主要原因之一。视网膜神经退化先于血管病变发生，这突显了识别早期分子生物标志物作为干预目标的必要性。凝血酶受体——蛋白酶激活受体-1（PAR1）是一种G蛋白偶联受体，参与凝血和神经炎症信号传导，在视网膜中表达，并被认为与晚期DR中的视网膜屏障功能障碍和血管生成有关。本研究探讨了其在早期糖尿病神经视网膜病变中的作用。我们在小鼠中通过链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病一个月后，分析了凝血酶/PAR1通路。我们测量了视网膜中的凝血酶活性和与凝血相关的基因表达，通过免疫荧光和细胞质/核分离Western blotting检测了PAR1的定位，并通过电视网膜图（ERG）评估了视网膜功能。此外，我们还评估了选择性凝血酶-PAR1调节剂PARIN5在这些指标上的治疗潜力。糖尿病视网膜中凝血酶活性（2.496 vs. 1.00 mU/ml，p = 0.01）和PAR1 mRNA表达（1.31 ± 0.11 vs. 1.00 ± 0.08，p = 0.028）均显著升高，而凝血酶原和因子X的mRNA表达则降低（0.64 ± 0.07 vs. 1.00 ± 0.05，p = 0.0025；0.75 ± 0.03 vs. 1.00 ± 0.09，p = 0.042）。免疫荧光显示PAR1染色增强，包括核定位，这一结果也得到了分离Western blotting的证实。PARIN5治疗降低了凝血酶活性（p = 0.0091），减轻了PAR1染色，并保持了视网膜在暗适应（治疗后的最大a波与糖尿病诱导前的比值：1.23 ± 0.13 vs. 0.39 ± 0.07，p = 0.0002；最大b波：1.15 ± 0.14 vs. 0.49 ± 0.08，p = 0.0083）和光适应（最大b波：1.21 ± 0.14 vs. 0.51 ± 0.05，p = 0.0024）状态下的ERG反应。重要的是，这些分子和功能变化并未伴随视网膜的形态学改变。总之，我们发现凝血酶/PAR1的升高及其向核内的转位是糖尿病视网膜病变的早期特征，并证明PARIN5治疗能够在结构病变出现之前保护视网膜功能。调节凝血酶/PAR1信号通路可能为阻止或延缓DR的进展提供一种新的治疗策略。