摘要
了解朊病毒蛋白（PrP）的生物合成、错误折叠和降解机制对于阐明朊病毒疾病的发病机制和探索治疗策略至关重要。在这里，我们开发了一种基于HaloTag的PrP融合蛋白（PrP-Halo），可以实时分析活细胞中的PrP生物合成、构象变化及其周转情况。HaloTag部分允许使用荧光配体进行特异性共价标记，从而便于进行脉冲追踪成像和不同PrP亚群的生化追踪。PrP-Halo保持了其生理定位、运输过程以及蛋白水解处理特性，忠实再现了天然PrP的行为。利用该系统，我们捕捉到了由致病突变引起的早期错误折叠事件。此外，我们还证明PrP-Halo可用于探究降低PrP浓度的化合物的作用机制，区分这些化合物对新合成PrP与细胞表面PrP的影响。综上所述，PrP-Halo成为一种多功能且灵敏的工具，可用于解析PrP错误折叠和周转的分子及细胞机制。
图形摘要
朊病毒蛋白（PrP）的错误折叠是导致致命神经退行性疾病的原因。我们开发了一种基于HaloTag的PrP融合蛋白，能够在活细胞中对不同的PrP亚群进行时空标记。该系统能够再现天然PrP的生物学特性，揭示疾病相关突变体中的早期错误折叠事件，并允许研究针对新合成PrP或细胞表面PrP的降PrP化合物的作用机制。
利益冲突
作者声明没有利益冲突。
数据可用性声明
支持本研究结果的数据可向通讯作者索取。
