改良的Langendorff-free方法用于从成年小鼠中分离心肌细胞和非心肌细胞

《BMC Biotechnology》：Modified langendorff-free method for isolating cardiomyocytes and non-cardiomyocytes from adult mice

　　

摘要

背景

成年小鼠的心肌细胞是心血管研究中的关键模型。高质量的分离对于研究疾病机制和药物筛选至关重要。然而，现有的方法受到专用设备依赖性和效率不一致性的限制，因此需要一种更方便、更可靠的方案。

方法和结果

我们开发了一种优化的、无需使用Langendorff技术的方法，用于从成年小鼠中分离心肌细胞和心脏纤维细胞。麻醉后，通过主动脉根部直接注入酶消化液，利用冠状循环实现组织的高效分离。这种方法获得的心肌细胞具有较高的存活率、完整的形态，并适合长期培养，其效果与标准的Langendorff技术相当。从功能上讲，分离出的心肌细胞对病理刺激（包括缺氧和肾上腺素能激动剂（异丙肾上腺素、去甲肾上腺素、苯肾上腺素）仍保持强烈的反应性，这体现在收缩功能、松弛动力学和钙处理方面的特征性变化上。此外，使用该方案共同分离出的心脏纤维细胞可以通过TGF-β成功激活，显示出肌纤维细胞标志物（如α-平滑肌肌动蛋白）和促纤维化信号通路的显著上调。

结论

本研究建立了一种新型、高效且易于实施的方法，可以同时从成年小鼠中分离出具有功能性的心肌细胞和心脏纤维细胞。该方案克服了现有技术的关键局限性，为心血管疾病的体外机制研究和药物发现提供了一个可靠的平台。

图形摘要

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