CD8+T淋巴细胞降低是高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)持续感染独立影响因素的分析

《International Journal of Women's Health》：Decreased CD8+ T Lymphocytes is an Independent Influencing Factor for Persistent HR-HPV Infection

　　

目的　探讨高危型人乳头瘤病毒(high-risk human papillomavirus, HR-HPV)感染患者阴道微生态改变特征及外周血免疫细胞亚群水平，并明确HR-HPV持续感染的独立危险因素，为宫颈病变的临床防治提供参考。方法　这项单中心观察性研究纳入2021年1月至2022年12月宁德闽东医院就诊的165例受试者，包括HR-HPV持续阳性49例及HR-HPV一过性感染116例。检测阴道微生态指标（清洁度、pH值、细菌性阴道病评分、过氧化氢、唾液酸酶）及外周血免疫细胞亚群进行分析。结果　与一过性感染组相比，持续感染组阴道微生态失衡更显著，表现为Ⅰ–Ⅱ度清洁度比例更低、细菌性阴道病(bacterial vaginosis, BV)评分≥4比例更高、pH≤4.5比例更低、过氧化氢及唾液酸酶(sialidase, SNA)阳性率更高（均P<0.05）；SNA在细胞学及病理结果≥高级别鳞状上皮内病变(high-grade squamous intraepithelial lesion, HSIL)组中亦显著升高（P<0.05）。持续感染组CD4+T淋巴细胞及CD8+T淋巴细胞百分比显著降低（P<0.05），而总T淋巴细胞、B淋巴细胞及自然杀伤(natural killer, NK)细胞两组间差异无统计学意义（P>0.05）。多因素Logistic回归分析显示CD8+T淋巴细胞降低是HR-HPV持续感染的独立危险因素（P<0.05）。结论　HR-HPV持续感染与阴道微生态失衡及细胞免疫功能受损密切相关。本探索性研究证实外周血CD8+T淋巴细胞降低与HR-HPV持续感染独立相关。综合评估阴道微生态状态及CD8+T淋巴细胞水平有助于识别高危人群，但其临床预测价值尚需大样本前瞻性研究验证。

论文解读：《Decreased CD8⁺T Lymphocytes is an Independent Influencing Factor for Persistent HR-HPV Infection》——发表于《International Journal of Women's Health》

一、研究背景与目的

宫颈癌(cervical cancer, CC)的发生发展与高危型人乳头瘤病毒(high-risk human papillomavirus, HR-HPV)持续感染密切相关，但并非所有HR-HPV感染均进展为宫颈癌，提示宿主因素参与疾病进程。阴道微生态由菌群及免疫介质组成，其失衡可诱导促炎因子及活性氧产生，影响上皮细胞基因组稳定性；HR-HPV可通过逃逸宿主免疫监视建立持续感染，细胞免疫功能受损会削弱生殖道局部防御。目前同时结合临床常规阴道微生态检测与外周血免疫细胞亚群探讨HR-HPV持续感染独立危险因素的研究较少。为此，研究人员开展该项单中心观察性研究，旨在分析HR-HPV感染患者阴道微生态变化及外周血T细胞、B细胞、NK细胞亚群特征，筛选HR-HPV持续感染的独立影响因素，为临床早期识别高危人群提供依据。

二、主要技术方法概述

研究人员采用单中心观察性队列设计，招募2021年1月—2022年12月宁德闽东医院妇科门诊及宫颈疾病专科就诊患者，经纳入排除标准筛选并完成6个月随访后最终纳入165例（HR-HPV持续感染组49例，一过性感染组116例；持续感染定义为同型HR-HPV间隔≥6个月两次及以上阳性）。采集阴道分泌物进行常规微生态检测（清洁度、pH、Nugent BV评分、过氧化氢H₂O₂、唾液酸酶sialidase/SNA、白细胞酯酶），采集EDTA抗凝外周静脉血经流式细胞术检测总T淋巴细胞、CD4⁺T淋巴细胞、CD8⁺T淋巴细胞、B淋巴细胞及NK细胞百分比；行液基细胞学(thinprep cytologic test, TCT)及宫颈活检组织病理学评估。采用t检验或Mann–Whitney U检验、χ²检验进行组间比较，ROC曲线确定CD4⁺/CD8⁺T淋巴细胞截断值，单因素及多因素二分类Logistic回归分析筛选独立危险因素（P<0.05为差异有统计学意义）。

三、研究结果

Baseline Characteristics of Participants（受试者基线特征）

经组间比较，持续感染组与一过性感染组在年龄、绝经状态、孕产史、糖尿病史、高血压史及避孕套使用史上差异无统计学意义（P>0.05）；持续感染组中口服避孕药使用率及近5年性伴侣数≥3者比例更高，吸烟及饮酒比例更低（P<0.05），说明性行为相关因素与HR-HPV持续感染存在关联。

Relationship Between Vaginal Microenvironment and Persistent HR-HPV Infection（阴道微环境与HR-HPV持续感染的关系）

持续感染组阴道Ⅰ–Ⅱ度清洁度比例（42.86% vs 58.62%）、pH≤4.5比例（24.49% vs 42.24%）均低于一过性感染组；BV评分≥4比例（71.43% vs 44.83%）、H₂O₂阳性率（95.92% vs 84.48%）及SNA阳性率（71.43% vs 52.59%）均高于一过性感染组（均P<0.05），提示持续感染者存在更显著的乳酸杆菌功能异常及厌氧菌过度生长所致微生态失衡。不同持续感染亚型（总HR-HPV持续 vs HPV 16/18持续）间阴道微生态指标无显著差异（P>0.05）。

Correlation Between Cervical Cytology/Pathology and Persistent HPV Infection（宫颈细胞学/病理与HPV持续感染的相关性）

两组细胞学≥HSIL比例差异无统计学意义（P>0.05）；病理≥HSIL比例两组亦相近（P>0.05），HR-HPV基因型别（含16/18型）分布两组间无显著差异（P>0.05）。

Relationship Between Vaginal Microenvironment and Cervical Lesions（阴道微环境与宫颈病变的关系）

按细胞学及病理活检结果分层分析发现，细胞学≥HSIL及病理活检≥HSIL患者中SNA阳性率均显著升高（P<0.05），提示SNA与宫颈高级别病变存在相关性。

Relationship Between Peripheral Immune Cells and HR-HPV Infection and Cervical Lesions（外周免疫细胞与HR-HPV感染及宫颈病变的关系）

持续感染组外周血CD4⁺T淋巴细胞百分比及CD8⁺T淋巴细胞百分比较一过性感染组显著降低（P<0.05），总T淋巴细胞、B淋巴细胞及NK细胞百分比两组间差异无统计学意义（P>0.05），表明HR-HPV持续清除失败与特异性细胞毒性T细胞及辅助T细胞水平下降有关。

Independent Risk Factors Associated with Persistent HR-HPV Infection（HR-HPV持续感染的独立危险因素）

ROC曲线确定CD8⁺T淋巴细胞截断值为24.86%，CD4⁺T淋巴细胞截断值为31.23%。单因素Logistic回归显示性伴侣数≥3、口服避孕药使用、阴道清洁度Ⅲ–Ⅳ度、BV阳性、SNA阳性及CD8⁺T淋巴细胞＜24.86%与持续感染相关（P<0.05）；多因素Logistic回归校正混杂因素后，仅CD8⁺T淋巴细胞＜24.86%（OR=2.673, P=0.011）是HR-HPV持续感染的独立危险因素。

四、讨论与结论总结

讨论指出阴道微生态失衡（乳酸杆菌减少、BV相关厌氧菌增多、SNA升高）破坏宫颈黏膜屏障并促进炎症，与HR-HPV持续感染及宫颈病变进展交互作用；外周血CD8⁺T淋巴细胞减少削弱对HPV E6/E7癌蛋白表位的识别与杀伤，不利于病毒清除，是持续感染的独立危险因素。研究局限性包样本量偏小、阴道微生态未行16S rRNA测序、外周血免疫指标不能完全代表宫颈局部免疫微环境。

研究结论翻译如下：

总之，本探索性观察研究表明HR-HPV持续感染与阴道微生态失衡（表现为清洁度差、BV评分升高、pH异常及H₂O₂和SNA水平升高）及细胞免疫功能受损（CD4⁺和CD8⁺T淋巴细胞降低）相关，其中CD8⁺T淋巴细胞降低是HR-HPV持续感染的独立危险因素。综合评估阴道微生态状态及外周血CD8⁺T淋巴细胞水平有助于识别HR-HPV持续感染高危人群，但其临床应用价值需经大样本多中心前瞻性研究验证。调节阴道微生态平衡及增强细胞免疫功能可能是预防HR-HPV持续感染的潜在策略，尚待干预研究证实。