《The Journal of Pathology: Clinical Research》：Clinicopathological and molecular characterization of HPV-associated cervical poorly cohesive carcinoma: a rare aggressive entity
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原发性宫颈印戒细胞癌及呈低黏附性形态的分化差腺癌少见，其临床病理特征尚缺乏系统描述。本研究将符合2019年WHO《消化系统肿瘤分类》低黏附性癌诊断标准的原发性宫颈低分化腺癌定义为"HPV相关宫颈低黏附性癌(HPV-associated cervical poo
原发性宫颈印戒细胞癌及呈低黏附性形态的分化差腺癌少见，其临床病理特征尚缺乏系统描述。本研究将符合2019年WHO《消化系统肿瘤分类》低黏附性癌诊断标准的原发性宫颈低分化腺癌定义为"HPV相关宫颈低黏附性癌(HPV-associated cervical poorly cohesive carcinoma, HPV-associated CPCC)"，并对其临床病理及分子特征进行阐述。研究纳入16例HPV-associated CPCC，按组织学分为印戒细胞亚型(n=4)、非特殊类型(NOS)(n=6)及混合型(n=6)。所有患者均为中国人(中位年龄46岁；范围30–66岁)，主要症状为阴道流血(100.0%)。所有肿瘤均检出高危型人乳头瘤病毒(HPV)，以HPV-18为主(n=13)，HPV-16两例，一例合并感染HPV-16、-18及-58。56.3%为晚期(FIGOⅢB–ⅣB期)，区域淋巴结转移率56.3%，远处转移率18.8%。镜下见弥漫性间质浸润(100%)、淋巴血管侵犯(75.0%)、坏死(75.0%)及促纤维结缔组织增生。免疫组化全部p16弥漫强阳性(block positivity)。抗体偶联药物(ADC)靶点呈异质性表达：HER2-low 33.3%，Trop-2阳性85.7%，nectin-4阳性42.9%，组织因子(TF)阳性92.3%。随访中疾病特异性死亡率50.0%，3年总生存率56.3%，晚期(45.0%)显著低于早期(75.0%)。全外显子测序(WES)示肿瘤突变负荷低(中位1.28 Muts/Mb)，AK1、ARHGAP39、KRT24、MICAL3、SLC6A9反复突变(各27.3%)，KRAS及KMT2C突变率18.2%，MUC2拷贝数增加(63.6%)，Y_RNA呈双向改变(获得54.5%/缺失45.5%)。综上，HPV-associated CPCC是以独特组织病理、HPV-18优势关联、晚期就诊多见及显著分子与生物标志物异质性为特征的侵袭性宫颈腺癌亚型。
论文解读：HPV相关宫颈低黏附性癌(HPV-associated Cervical Poorly Cohesive Carcinoma, HPV-associated CPCC)的临床病理及分子特征研究
研究背景与目的
宫颈腺癌(cervical adenocarcinoma, CADC)占宫颈癌比例逐年上升，其中呈低黏附性生长模式（如原发性宫颈印戒细胞癌signet-ring cell carcinoma, SRCC）的罕见亚型长期被低估或误诊为胃肠道转移性低黏附性癌。消化系统肿瘤中"低黏附性癌(poorly cohesive carcinoma, PCC)"概念已明确，但宫颈对应实体尚缺系统界定。鉴于此类肿瘤形态似胃低黏附性癌、临床行为侵袭且HPV状态未明，研究人员开展此项研究以明确符合消化道PCC标准的HPV相关宫颈原发低黏附性癌——即HPV-associated CPCC——的临床病理谱、免疫表型、潜在治疗靶点及基因组-蛋白组学特征，为病理诊断、临床分期及靶向治疗提供依据。本文发表于The Journal of Pathology: Clinical Research。
主要技术方法与样本来源
研究人员回顾性筛选福建省肿瘤医院2009–2024年初治宫颈腺癌2,500例中经三位病理医师复阅符合PCC形态者，排除HPV(-)/p16(-)无法除外胃肠转移者，最终入组16例经胃镜/影像学证实无胃肠胰乳腺原发灶且HPV PCR及p16免疫组化(immunohistochemistry, IHC)双阳性的原发性HPV-associated CPCC。技术方法包括：(1)H&E形态学评估与组织学分型；(2)IHC检测E-cadherin、p16、PAX8、CK7/20、Villin、CDX2、SATB2、MUC6、Claudin 18.2、CK5/6、p40、p53、错配修复(mismatch repair, MMR)蛋白(MLH1/PMS2/MSH2/MSH6)、PD-L1(CPS评分)、HER2(2017 CAP/ASCO胃癌指南)、Trop-2、nectin-4、组织因子(tissue factor, TF)；(3)实时荧光PCR进行HPV基因分型(AmoyDx试剂盒，检测17种高危型)；(4)对11例配对样本行全外显子测序(whole-exome sequencing, WES, Agilent SureSelect V8捕获，MGISEQ-T7平台，GATK Mutect2变异识别，CNVkit拷贝数分析)；(5)对11例行蛋白质组学DIA-LC–MS/MS分析，差异表达蛋白(differentially expressed proteins, DEPs)鉴定及Gene Ontology(GO)富集分析；(6)Kaplan–Meier生存分析(SPSS 23.0)。
研究结果
Patients' clinical characteristics（患者临床特征）
16例均为中国女性，中位年龄46岁(30–66岁)，100%以便血/阴道流血为首发症状，1例伴下腹痛。高危HPV阳性率100%，HPV-18占81.3%(13/16)，HPV-16两例，一例共感染HPV-16/-18/-58。肿瘤标志物升高率：CEA 11/16、CA125 7/16、CA199 7/16。FIGO 2018分期：ⅠB2–ⅣB，晚期(ⅢB–ⅣB)占56.3%(9/16)；区域淋巴结转移56.3%(9/16)，远处转移(M1)18.8%(3/16，颈淋巴结及卵巢)。治疗含手术+辅助治疗或放化疗±靶向/免疫，中位随访26个月，疾病死亡7/14例，3年总生存(overall survival, OS)56.3%，晚期3年OS 45.0% vs 早期75.0%。
Pathological features（病理特征）
肿瘤中位径4.7 cm(2.5–8.0 cm)，50%侵及宫旁。镜检为散在或小簇低黏附肿瘤细胞浸润宫颈间质，分SRCC(≥90%印戒细胞，n=4)、NOS(<10%印戒细胞，n=6)及混合型(≥10%且<90%印戒细胞成分或伴其他腺癌成分，n=6)。印戒细胞含胞质黏液空泡并将核挤向一侧；NOS型细胞似淋巴细胞或组织细胞，可呈单行线状("Indian filing")排列。75%见淋巴血管侵犯(lymphovascular space invasion, LVSI)，75%伴坏死，50% E-cadherin表达减弱/丢失，全部p16弥漫强阳性。部分混合亚型含浸润性复层产黏液癌(invasive stratified mucin-producing carcinoma, ISMC)或普通型宫颈腺癌(usual-type cervical adenocarcinoma, UCA)成分。
Immunophenotypic characteristics（免疫表型特征）
p16全例block positivity；PAX8仅1例弥漫+、2例局灶+，其余阴性；CK7 90.0%阳性，CK20偶阳(11.1%)，Villin/CDX2/SATB2/MUC6部分弱阳，Claudin 18.2、CK5/6、p40均阴性。p53野生型表达87.5%，突变型12.5%；MMR蛋白MSH6缺失1例(7.1%)。PD-L1(CPS≥1)阳性31.3%(5/16)。ADC靶点：HER2 2+(20%)、1+(13.3%)、阴性66.7%(FISH均阴，含HER2-low表达)，Trop-2 3+ 64.3%、2+ 21.4%(阳性率85.7%)，nectin-4 2+ 42.9%，TF 3+ 76.9%、2+ 15.4%(阳性率92.3%)。
Treatment and outcomes（治疗与预后）
7例放化疗，2例化疗+靶向，7例手术+术后辅助治疗。14例可评估随访中，病死率50.0%，带瘤生存35.7%，无瘤生存14.3%。汇总文献12例加本组16例(n=28)示中位年龄47岁，HPV-18为主(85.0%)，晚期占57.1%，3年OS 54.3%，晚期仅32.7% vs 早期88.9%(p=0.0067)，印证其高度恶性。
Whole-exome sequencing revealed the molecular characteristics of HPV-associated CPCC（全外显子测序揭示分子特征）
肿瘤突变负荷(tumor mutational burden, TMB)低(中位1.28 Muts/Mb)。体细胞突变：AK1、ARHGAP39、KRT24、MICAL3、SLC6A9各27.3%(3/11)，KRAS及KMT2C各18.2%，以点突变(missense)为主。拷贝数变异(copy number variation, CNV)：MUC2获得63.6%，Y_RNA获得54.5%及缺失45.5%，部分其他粘蛋白基因及非编码RNA改变。
Mutational landscape of HPV-associated usual-type endocervical adenocarcinoma (UECA) in TCGA and comparative analysis with HPV-associated CPCC（TCGA中HPV相关普通型宫颈内腺癌突变谱及与CPCC比较）
TCGA UECA(n=42)高频突变为PIK3CA(38.1%)、KMT2C(21.4%)、KRAS(19.0%)等，涉及PI3K/AKT/mTOR、HER2信号及抑癌基因失活。CPCC与之共享KRAS(18.8%)及KMT2C(18.8%)，但具独有高频突变(AK1等27.3%)及更低TMB，提示不同致癌驱动机制。
Proteomic profiling of DEPs in HPV-associated CPCC（蛋白组差异表达分析）
差异表达蛋白共2,435个(上调92.6%)，GO富集显示细胞外基质重塑、细胞黏附/迁移、上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)、血管生成及基底膜组分改变。筛选出20个核心DEPs，10个上调核心蛋白分两组：Group1(GMIP、TIGAR、LAMB3、C1ORF122、MYO18A)及Group2(ASCC1、P4HB、TMED2、PXN、CKAP4)，与黏附丧失、侵袭迁移及代谢/内质网应激适应相关。
讨论与结论（翻译浓缩）
综合本组及文献共28例，HPV-associated CPCC是宫颈腺癌中具侵袭性的罕见亚型，中位发病47岁，多以便血就诊，HPV-18占优势(约86.7%)，超半数确诊即为FIGOⅢ–Ⅳ期，3年OS仅54.3%，E-cadherin半数表达减失反映低黏附侵袭特性。主要鉴别诊断需排除胃肠转移性低黏附性癌（经内镜/影像排查、p16 block阳性+HPV(+)支持CPCC、PAX8局灶阳性亦支持）、乳腺小叶癌(TRPS1/GATA3/ER+、HPV(-))及胃型腺癌(HPV(-)、p16非block)。因其不良预后，ADC靶点Trop-2(85.7%中-强阳)、TF(92.3%)、nectin-4及HER2-low提示潜在靶向/ADC治疗机会，PD-L1阳性亚群或可获益于免疫检查点抑制剂。WES示极低TMB，独见AK1等参与腺苷代谢及细胞骨架调控基因突变及MUC2拷贝数增加，区别于UECA之PIK3CA高频突变。蛋白组证实黏附/迁移及代谢适应相关通路活化。尽管受限于小样本及部分晚期病例取材为活检，本研究首次系统定义HPV-associated CPCC这一独立病种，为病理诊断更新、危险分层及新型靶向治疗探索提供框架。
