摘要
淋巴结转移是乳腺癌预后不良的重要指标。源自乳腺癌的外泌体会影响肿瘤微环境中的细胞间通讯，进而推动转移进程。然而，外泌体究竟通过何种机制促进乳腺癌的淋巴结转移，目前尚不清楚。我们对血清中的外泌体进行小RNA测序，以识别与乳腺癌淋巴结转移相关的Piwi相互作用RNA（piRNAs）。我们对外泌体中的piR-hsa-28212进行了功能研究，包括在体外检测人类淋巴管内皮细胞的迁移和管状形成能力，以及在体内进行的足垫-腘窝淋巴结转移模型实验。通过荧光素酶报告基因实验，验证了piR-hsa-28212与T-box转录因子1（TBX1）以及TBX1与血管内皮生长因子受体3（VEGFR3）之间的特定相互作用。还利用放线菌素D实验分析了TBX1 mRNA的稳定性。通过RNA拉取实验、RNA免疫沉淀实验以及RNA荧光原位杂交实验，研究了piR-hsa-28212与METTL3之间的相互作用。在患有淋巴结转移的乳腺癌患者的血清外泌体中，piR-hsa-28212的表达显著升高。该外泌体在体外能够增强人类淋巴管内皮细胞的迁移和管状形成能力，在体内则能促进淋巴管生成和淋巴结转移。从机制上来看，来自乳腺癌细胞的外泌体中的piR-hsa-28212转移到人类淋巴管内皮细胞后，可稳定TBX1 mRNA的表达，进而提升VEGFR3的表达水平。在乳腺癌细胞中，piR-hsa-28212可直接结合并稳定METTL3蛋白，从而调节血管内皮生长因子C（VEGFC）mRNA的N6-甲基腺苷化修饰，最终增加VEGFC的表达和分泌。总体而言，这些研究结果揭示了一种由外泌体介导的piRNA调控机制，该机制可通过协同增强VEGFC/VEGFR3信号通路来推动乳腺癌的淋巴结转移，同时也表明piR-hsa-28212可能是一种潜在的治疗靶点。
试验注册编号： KYLL-2022-338
利益冲突声明
作者声明不存在任何利益冲突。
数据可用性说明
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