血小板膜P-选择素（Platelet Membrane P-selectin, P-sel）作为糖尿病视网膜病变发生发展的危险因素——一项试点研究（Pilot Study）

《Bratislava Medical Journal》：Platelet Membrane Selectin as a Risk Factor in the Development of Diabetic Retinopathy – A Pilot Study

　　

摘要：在这项试点研究中，研究人员旨在观察血小板膜P-选择素（platelet membrane selectin, P-sel）及可溶性P-选择素（soluble platelet selectin, sP-sel）作为2型糖尿病（Type 2 Diabetes Mellitus, T2DM）患者发生糖尿病视网膜病变（Diabetic Retinopathy, DR）危险因素的作用。本研究基于既往其他作者未曾报道的观察结果展开。研究人员纳入49例于德布勒森大学眼科门诊接受定期糖尿病眼科筛查的伴或不伴视网膜病变的T2DM患者，采用流式细胞术（flow cytometry）分析血小板膜P-sel，并测定血浆sP-sel水平。结果显示，非增殖性糖尿病视网膜病变（non-proliferative diabetic retinopathy, NPDR）组的P-sel平均荧光强度（Mean Fluorescence Intensity, MFI）显著高于对照组（p = 0.037）及无视网膜病变组（p = 0.039）；增殖性糖尿病视网膜病变（proliferative diabetic retinopathy, PDR）组P-sel MFI较NPDR组降低。合并糖尿病视网膜病变患者血清sP-sel显著升高（p = 0.044）。结论：P-sel可导致动静脉侧血液循环障碍，参与NPDR的发生发展，而在增殖期其致病作用可能减弱；sP-sel可能通过小动脉硬化诱导的缺氧参与各期糖尿病视网膜病变的发生。

《Platelet Membrane Selectin as a Risk Factor in the Development of Diabetic Retinopathy – A Pilot Study》论文解读

本研究发表于《Bratislava Medical Journal》。糖尿病视网膜病变（Diabetic Retinopathy, DR）是糖尿病常见的微血管并发症，其病理基础为毛细血管闭塞及微循环障碍，血小板活化及内皮功能障碍在其发病中起重要作用。P-选择素（P-selectin, CD62P）贮存于静息血小板的α颗粒及内皮细胞的Weibel-Palade小体中，活化后表达于血小板膜表面（膜结合型P-sel）或以脱落形式形成可溶性P-选择素（soluble P-selectin, sP-sel）存在于血浆中。既往研究表明sP-sel与高血压、动脉粥样硬化及缺血性心脑血管病等系统性疾病相关，且部分研究提示其与DR存在关联，但较少有研究分层分析膜结合型P-sel及sP-sel在各期DR（非增殖性NPDR与增殖性PDR）中的差异及其与糖尿病病程等因素的关系。为此，研究人员开展此项试点研究，探讨血小板膜P-sel及血浆sP-sel水平与T2DM患者DR发生及分期的相关性，以明确二者是否可作为DR发生的危险因子，并分析其与糖尿病病程、糖化血红蛋白（HbA1_c）及其他合并症的关系。研究最终发现膜结合P-sel在NPDR阶段显著升高，提示其参与早期DR的微血管闭塞过程，而sP-sel在各期DR中均升高，提示其可作为DR发生的潜在血清学标志。

主要技术方法概述：

研究人员设计了一项假设驱动的试点研究，招募于德布勒森大学眼科门诊接受定期筛查的2型糖尿病（Type 2 Diabetes Mellitus, T2DM）患者，排除有心血管衰竭、卒中、重度肾病、抗凝治疗史及其他非糖尿病性眼底疾病者，最终纳入49例T2DM患者［无视网膜病变组（No DR, N=17）、NPDR组（N=20）、PDR组（N=12）］及24例年龄性别匹配的健康对照。所有受试者行完整眼科检查（裂隙灯、散瞳眼底镜检查及彩色眼底照相），按早期治疗糖尿病视网膜病变研究（Early Treatment Diabetic Retinopathy Study, ETDRS）标准分期。采集枸橼酸钠抗凝静脉血，流式细胞术检测血小板膜P-sel表达并以平均荧光强度（Mean Fluorescence Intensity, MFI）表示，酶联免疫吸附试验（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA）测定血浆sP-sel浓度，同时检测HbA1_c等生化指标。统计学分析采用Kolmogorov-Smirnov检验正态性，正态分布资料用独立样本t检验，非正态资料用Mann-Whitney U检验，相关性分析采用Spearman法，p＜0.05为差异有统计学意义。

研究结果

3 Results

研究人员将49例T2DM患者分为无视网膜病变组（17例，平均年龄62.27±11.06岁）、NPDR组（20例，63.5±11.6岁）及PDR组（12例，63.25±10.7岁），各组与对照组（24例）年龄及性别匹配（p＞0.05）。

P-sel的MFI中位数分别为：无视网膜病变组50.0（95% CI 37.6–83.4），NPDR组62.7（95% CI 51.3–99.3），PDR组50.5（95% CI 38.83–80.7），对照组52.1（95% CI 44.48–64.42）。NPDR组P-sel MFI显著高于对照组（p＝0.037）及无视网膜病变组（p＝0.039）；PDR组较NPDR组降低但差异无统计学意义。由此得出结论：膜结合P-sel在NPDR阶段显著上调，可能参与早期DR的微血管循环障碍。

sP-sel平均水平分别为：无视网膜病变组35.2 ng/mL（95% CI 30.5–39.8），NPDR组40.9 ng/mL（95% CI 35.4–46.4），PDR组40.5 ng/mL（95% CI 28.35–52.7），对照组35.3 ng/mL（95% CI 30.9–39.7）。DR患者（NPDR＋PDR）sP-sel水平显著高于无视网膜病变组及对照组（p＝0.044）。由此得出结论：sP-sel升高与DR的发生相关，不受DR分期影响。

相关性分析显示，PDR组中膜P-sel水平与糖尿病病程呈显著负相关（r＝－0.58，p＝0.046），提示病程延长进入增殖期后，P-sel在DR发病中的初始作用被其他炎症或血管生成因子所取代。

讨论与结论总结（翻译结论部分）：

讨论指出糖尿病患者常伴高血压、高脂血症及缺血性心脏病，血小板活化后膜P-sel增加可促进白细胞黏附于毛细血管内皮引起管腔阻塞及视网膜缺血，此过程在非增殖期尤为突出，故NPDR组P-sel显著升高；进入增殖期后，血管内皮生长因子（Vascular Endothelial Growth Factor, VEGF）等促血管生成及炎症介质作用占主导，P-sel膜表达相对下降，且与病程呈负相关。sP-sel通过介导内皮损伤、小动脉硬化及毛细血管狭窄导致缺氧，参与各期DR发生，与既往文献报道一致。本研究局限性为样本量较小及严格排除标准限制外推性，但组间差异具统计学意义，提示生物学相关性。

研究结论：血小板膜P-选择素（platelet membrane P-selectin, P-sel）可能是非增殖性糖尿病视网膜病变（non-proliferative diabetic retinopathy, NPDR）发生发展的危险因素。当检测到P-选择素升高时，可考虑抗血小板药物治疗的潜在价值，但这尚需进一步研究验证而非直接用于临床推荐。