RmTIL是一种富含半胱氨酸的蛋白质，被认为是微小硬蜱中的微生物群调节因子

《Parasitology Research》：RmTIL, a cysteine-rich protein as a putative microbiota modulator from Rhipicephalus microplus tick

　　

摘要

Rhipicephalus microplus，即“牛蜱”，分布于全球的热带和亚热带地区，给畜牧业造成重大经济损失。在本研究中，通过噬菌体展示技术与第三代测序（TGS）高通量技术相结合，鉴定出一种在唾液腺中产生的具有免疫原性的富含半胱氨酸的蛋白质。该蛋白质含有来自R. microplus的类胰蛋白酶抑制剂结构域，此处命名为RmTIL，作为重组蛋白被表达出来，并作为丝氨酸蛋白酶抑制剂进行了功能研究。其TIL结构域对应的重组蛋白（rRmTIL-D）能够抑制人类中性粒细胞弹性蛋白酶、组织蛋白酶G和枯草溶菌素A，抑制常数（K_i）分别为7.0、32.7和182.5纳摩尔。研究还利用RNA干扰技术检测了RmTIL基因表达对饱食状态雌性蜱虫生殖参数的影响，发现基因沉默后卵子的存活率显著下降。此外，RmTIL基因沉默会导致卵巢和卵子中16S细菌rRNA水平上升，而用革兰氏阳性细菌感染蜱虫则会使RmTIL转录本含量增加。在细菌负荷增加后，RNAi沉默处理的雌性蜱虫所产卵子中与胚胎发育、脂质代谢、氧化还原反应以及能量代谢相关的基因也发生了变化。这些数据表明，RmTIL是一种具有免疫原性的蛋白质，它既能够抑制宿主蛋白酶，又能调节蜱虫的微生物群，这两者都对R. microplus的生命周期至关重要。