KNG-1、HSPG和Robo4反映高血压驱动的亚临床肾脏改变并在2型糖尿病肾病中提供增量诊断价值

《Scientific Reports》：KNG-1, HSPG and Robo4 reflect hypertension-driven subclinical renal alterations and provide incremental diagnostic value in type 2 diabetic nephropathy

　　

糖尿病肾病（DN），以持续性尿白蛋白排泄或白蛋白尿为指标，是全球终末期肾病的主要原因。目前，白蛋白尿被认为是2型糖尿病患者发生DN的最佳预测指标，但在老年患者中，它也常由动脉性高血压或心力衰竭引起。因此，需要额外的生物标志物来识别具有DN高风险的糖尿病患者。该研究的目的是调查一些血清蛋白质组生物标志物的表达谱，并证明它们与2型糖尿病患者早期肾脏改变的相关性。本研究包括300名2型糖尿病患者，其中200名有持续性白蛋白尿（UACR > 30 mg/gm），100名无（UACR < 30 mg/gm），以及100名健康对照受试者。研究人员评估了所有参与者的KNG-1、HSPG、Robo4和其他生化参数的血清表达模式。研究人员还评估了高血压和白蛋白尿对这些标志物的联合影响，以探索它们作为T2DM早期肾脏风险的非侵入性指标的潜力。结果表明，2型糖尿病患者血清KNG-1、HSPG和Robo4水平升高可能反映了由于多种机制导致的DN进展性病理。高血压和白蛋白尿之间的相互作用以协同方式显著改变了生物标志物水平，强调了在临床实践中对这两种情况进行综合管理的必要性。此外，研究结果强调，这些生物标志物的血清蛋白质组特征在与传统临床参数整合时提供了增量预测价值，多变量回归模型性能和判别准确性分析的显著改善证明了这一点。

论文解读文章

糖尿病肾病（diabetic nephropathy, DN）是2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus, T2DM）最常见的微血管并发症之一，也是全球终末期肾脏病（end-stage renal disease, ESRD）的主要病因。目前，临床通常依赖尿白蛋白与肌酐比值（urinary albumin-to-creatinine ratio, UACR）来预测和诊断DN，但UACR在老年患者中常受高血压或心力衰竭干扰，且部分早期DN患者的UACR仍处于正常范围，导致诊断延迟。因此，迫切需要新的生物标志物来识别DN高风险人群，尤其是合并高血压的T2DM患者。研究人员开展本研究，旨在探讨血清激肽原-1（kininogen-1, KNG-1）、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（heparan sulfate proteoglycan, HSPG）和Roundabout同源物4（roundabout homolog 4, Robo4）在T2DM患者中的表达模式，并评估高血压和白蛋白尿对其水平的联合影响，以探索这些标志物在早期肾脏改变中的辅助诊断价值。该研究发表在《Scientific Reports》。

本研究为横断面病例对照研究，主要关键技术方法包括：从埃及开罗国家糖尿病与内分泌研究所（National Institute for Diabetes and Endocrinology, NIDE）门诊招募300例T2DM患者（根据UACR分为200例持续性白蛋白尿组和100例正常白蛋白尿组）及100例年龄、性别匹配的健康对照。采用酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）测定血清KNG-1、HSPG和Robo4水平，并检测常规生化指标（血糖、糖化血红蛋白、血脂、肌酐、UACR等）及血压。利用IBM SPSS Statistics（版本22.0）进行统计学分析，包括独立样本t检验、卡方检验、Pearson相关分析、双因素方差分析（two-way ANOVA）、多变量线性回归和逻辑回归，以及受试者工作特征（receiver operating characteristic, ROC）曲线分析。

**研究结果**

1. **糖尿病组与健康对照组比较**：通过t检验发现，与健康对照相比，T2DM患者的体重指数、收缩压、舒张压、空腹血糖、糖化血红蛋白、HOMA-IR、总胆固醇、甘油三酯、尿素、肌酐、UACR显著升高，高密度脂蛋白胆固醇和肾小球滤过率（estimated glomerular filtration rate, eGFR）显著降低；HSPG和Robo4血清水平显著升高（P<0.05），但KNG-1无显著差异。

2. **伴与不伴DN的糖尿病患者比较**：在T2DM患者中，将持续性白蛋白尿（DN）组与正常白蛋白尿组比较，SBP、DBP、FBG、A1C、胆固醇、甘油三酯、UACR、KNG-1、HSPG和Robo4均显著升高（P<0.05），而eGFR等无显著差异。

3. **高血压对生物标志物水平的影响**：将糖尿病患者按是否合并高血压进一步分组，结果显示，合并高血压的DN患者血清KNG-1、HSPG和Robo4水平显著高于无高血压的DN患者（P<0.05），微白蛋白浓度也显示约3倍升高；而在正常白蛋白尿患者中，高血压对上述标志物无显著影响。

4. **高血压与白蛋白尿的交互作用**：双因素方差分析结果显示，高血压和白蛋白尿对KNG-1、HSPG和Robo4水平均存在显著独立效应，并且两者之间存在显著交互作用（P均<0.05），交互作用图显示协同增强效应，提示高血压和DN共同加剧了生物标志物的上调。

5. **生物标志物的诊断性能**：ROC曲线分析表明，在区分有无DN的T2DM患者时，KNG-1的AUC为0.839，HSPG为0.864，Robo4为0.777（均P<0.001），均显示出良好至优秀的辨别能力；而在区分糖尿病和健康对照时，仅HSPG显示中等诊断价值（AUC=0.657），KNG-1和Robo4无效。

6. **生物标志物的增量预测价值**：在正常白蛋白尿亚组中，Pearson相关分析显示Robo4与eGFR轻度相关（r=0.196），多变量线性回归中Robo4为边界显著独立预测因子。进一步对全部T2DM患者进行多变量逻辑回归，在临床变量（年龄、性别、BMI、病程、A1C、SBP）基础上加入KNG-1、HSPG和Robo4后，模型预测能力显著提升：Nagelkerke R²从0.279增至0.665，-2对数似然值大幅下降，ROC曲线AUC从0.771升至0.931，表明这些生物标志物提供了显著的增量预测价值。

**讨论与结论**

讨论部分强调，高血压和白蛋白尿对KNG-1、HSPG和Robo4水平的协同影响提示二者共同加剧了内皮功能障碍和微血管损伤，综合管理两种危险因素至关重要。这些标志物与血压及UACR的强相关性进一步支持其作为肾血管损伤整合指标的价值。研究结论指出：本研究表明，高血压和白蛋白尿并存对KNG-1、HSPG和Robo4的表达模式具有显著的协同影响，提示在临床实践中需同时严格管理这两种状态以减缓DN进展。这些血清生物标志物与传统临床参数联合使用时，可提供显著的增量预测价值，有助于更精准地对T2DM患者进行风险分层，尤其在正常白蛋白尿阶段可能捕捉到早期亚临床肾脏改变。未来的纵向多中心研究需进一步验证这些标志物对肾功能下降的预测效用及其在临床决策中的潜在作用。