整合式宫颈自采样用于液基细胞学、高危型人乳头瘤病毒及性传播感染检测：一项前瞻性研究

《Diagnostics》：Integrated Cervical Self-Sampling for Cytology, High-Risk Human Papillomavirus, and Sexually Transmitted Infection Testing: A Prospective Study

　　

背景/目的：宫颈自采样越来越多地用于高危型人乳头瘤病毒（hrHPV）检测，但整合式液基细胞学（LBC）和性传播感染（STI）检测的证据有限。本研究评估了一种整合式单步自采样方法用于LBC、hrHPV和STI检测的可行性和诊断一致性。方法：在这项前瞻性配对研究中，纳入了2024年12月至2025年2月期间接受宫颈癌筛查的520名韩国女性。每位参与者首先使用Earlypap?进行宫颈自采样，随后进行临床医生采集的样本。配对样本用于LBC、hrHPV和STI检测。计算百分比一致性和Cohen’s kappa系数（κ）。结果：首次尝试自采样的成功率为98.5%，92.1%的参与者偏好自采样而非临床医生采集。LSIL在自采样本中检出率为2.3%，临床医生采样本中为1.2%；HSIL在两种样本类型中均为0.4%。hrHPV阳性率在自采样本中为14.8%，临床医生采样本中为12.9。Ureaplasma spp.频繁检出，Candida albicans约在5%的样本中检出。LBC总体一致性为91.7%（κ = 0.67），hrHPV为95.4%（κ = 0.79），STI为97.0%（κ = 0.72）。结论：使用单步装置的整合式宫颈自采样显示出高可行性与基于临床医生采样的一致性，支持其提高筛查效率和减少参与障碍的潜力。

**论文解读文章**

**研究背景与问题**
宫颈癌仍是全球重大公共卫生负担，尽管已有有效筛查策略和疫苗接种计划，但筛查覆盖率仍存在差异，尤其在接受筛查不足的人群及中低收入国家。高危型人乳头瘤病毒（hrHPV）检测已被世界卫生组织推荐为≥30岁女性的主要筛查方法，这加速了对自采样作为临床医生采样替代方案的兴趣。既往研究表明，自采样本在hrHPV检测中诊断性能与临床医生采样本相当，且具有改善隐私、便利性和参与率的实际优势。然而，大多数自采样研究仅聚焦于hrHPV检测。液基细胞学（LBC）因在年轻女性中具有更高特异性并能检出非HPV相关异常而仍具临床相关性。细胞学样本的充分性取决于获取足够的鳞状细胞和柱状/转化区成分，这在使用传统阴道自采样装置时可能难以实现。此外，性传播感染（STI）常与HPV共存，导致生殖健康发病风险增加。将细胞学、hrHPV和STI检测整合到单一自采样本中有望简化筛查流程并减少重复就诊，但相关数据仍然有限。为此，研究人员开展本研究，旨在评估一种新型自采样装置（Earlypap?）同时进行细胞学、HPV和STI检测的可行性和诊断一致性。

**研究内容与结论**
研究人员在2024年12月至2025年2月期间，于韩国清州Motaean女性医院招募了520名接受常规宫颈癌筛查的女性。每位参与者先使用Earlypap?装置进行宫颈自采样，随后由临床医生使用阴道镜细胞刷采集配对样本。所有样本均分析LBC、hrHPV和STI。结果显示：首次自采样成功率为98.5%，92.1%参与者偏好自采样。LBC不满意率在自采样本和临床医生采样本中分别为1.4%和1.7%，转化区成分检出率分别为83.1%和85.2%。自采样本中LSIL检出率2.3%，HSIL 0.4%；临床医生采样本中LSIL 1.2%，HSIL 0.4%。hrHPV阳性率自采样本14.8%，临床医生采样本12.9%。STI检出率自采样本46.8%，临床医生采样本44.8%。LBC诊断一致性91.7%（κ=0.67），hrHPV一致性95.4%（κ=0.79），STI一致性97.0%（κ=0.72）。该研究证实，使用Earlypap?装置的单步整合式宫颈自采样具有高可行性和与临床医生采样本的实质性一致性，支持其提高筛查效率和减少参与障碍的潜力。该论文发表在《Diagnostics》。

**关键技术方法**
本研究采用配对前瞻性设计，样本队列来源为韩国清州一家妇科诊所的520名筛查女性。主要技术方法包括：（1）使用Earlypap?自采样装置（Biodyne, 首尔, 韩国）进行宫颈自采样，无需阴道窥器，参与者按标准书面及图示指导完成操作。（2）液基细胞学（LBC）采用PATHPLORER AUTO LBC系统（Blowing Technology^TM, Biodyne）处理样本，经细胞过滤和自动制片后，行巴氏染色，由一名对采样方法设盲的病理学家依据2014年Bethesda系统判读。（3）hrHPV基因分型使用cobas? 4800系统（Roche, Santa Clara, CA, USA），可分别检出HPV16、18及其他12种高危型别（31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68）的混合结果。（4）STI检测（针对<60岁参与者）采用NextGene^TM STI-12 Detection Kit（EONEBIOTECH, 仁川, 韩国）进行多重实时PCR，靶向淋病奈瑟菌、生殖支原体、单纯疱疹病毒1型、单纯疱疹病毒2型、梅毒螺旋体、沙眼衣原体、人型支原体、白色念珠菌、阴道毛滴虫、微小脲原体和解脲脲原体。统计方法采用百分比一致性和Cohen’s kappa系数（κ）评估两种采样方法间的一致性。

**研究结果**
**3.1 参与者特征与自采样可接受性**
最大年龄组为30–39岁（44.2%），12.5%参与者无既往宫颈癌筛查史，<30岁女性比例最高（33.0%）。首次自采样成功率98.5%（511/520），仅9人（1.7%）因装置污染或保存液溢出需第二次尝试。97.3%参与者认为操作容易，92.1%偏好自采样，94.6%表示未来愿意使用。中位自采样时间为100秒，≥60岁参与者用时较长。该结果表明自采样在筛查人群中的高度可行性和可接受性。

**3.2 细胞学**
自采样本与临床医生采样本的LBC不满意率相当（1.4% vs. 1.7%）。自采样本中转化区（EC/TZ）成分检出率为83.1%，临床医生采样本为85.2%。异常细胞学结果包括ASC-US（两种方法均为5.2%）、LSIL（自采2.3% vs. 临床1.2%）和HSIL（均为0.4%）。两个HSIL病例在两种方法中一致。总体细胞学诊断一致性为91.7%，κ=0.67（95%CI: 0.53–0.82），显示实质性一致。年龄分层分析显示，<30岁女性异常细胞学患病率最高，中年组降低，≥60岁女性略有上升。白色念珠菌在自采样本中检出率为5.6%，临床医生采样本为5.2%。

**3.3 高危型人乳头瘤病毒检测**
自采样本中hrHPV检出率14.8%（77/520），临床医生采样本12.9%（67/520）。两种方法间hrHPV检测一致性为95.4%，κ=0.79（95%CI: 0.71–0.87），表明实质性一致。hrHPV阳性病例中，17例仅自采样本检出，7例仅临床医生采样本检出。年龄分层显示hrHPV患病率在<30岁女性中最高，随年龄增长下降，≥60岁女性出现二次升高。

**3.4 性传播感染检测**
自采样本中STI病原体检出率46.8%（236/504），临床医生采样本44.8%（226/504）。总体一致性97.0%，κ=0.72（95%CI: 0.65–0.78），显示实质性一致。Ureaplasma spp.是最常见检出微生物，约占阳性病例的40%；白色念珠菌约5%。沙眼衣原体在自采样本中检出3例，临床医生采样本中2例。STI患病率在<30岁参与者中最高，随年龄增长递减。

**3.5 筛查后宫颈活检结果**
活检作为常规临床实践选择性进行，未为所有hrHPV阳性或细胞学异常参与者强制要求。在hrHPV阳性而细胞学阴性的自采样本中，2.6% (2/77) 接受了活检（两种方法同一病例），结果为一例阴性、一例HSIL。在自采样本ASC-US且hrHPV阳性者中，42.1% (8/19) 活检，组织学证实LSIL 6例、HSIL 2例。LSIL且hrHPV阳性者中，41.7% (5/12) 活检，均为LSIL。自采和临床医生采样均检出的HSIL且hrHPV阳性者，病理均证实为HSIL。

**总结讨论**
本研究发现与既往关于自采样本用于宫颈癌筛查的meta分析结果一致，hrHPV检测的κ=0.79高于既往汇总的κ=0.72，支持PCR-based HPV检测时自采样本与临床医生采样本的较好一致性。细胞学方面，自采样本不满意率低且与临床医生采样本有实质性一致（κ=0.67），包括HSIL病例的一致检出，提示Earlypap?装置可提供适合LBC的宫颈细胞材料。该研究创新点在于从单次自采宫颈样本中整合了细胞学、hrHPV和STI检测，而既往研究多集中于单一检测。参与者对自采样的高偏好率和首次成功率高，表明该方法在常规筛查中实用且可接受。保存液同时维持细胞形态和核酸完整性，使三种检测可从单一收集管完成。STI分子检测发现Ureaplasma spp.和人型支原体高频检出，但需注意对无症状女性不推荐常规筛查和治疗，白色念珠菌不属于STI，因此实际临床应用应遵循指南推荐，重点关注沙眼衣原体、淋病奈瑟菌和阴道毛滴虫等目标病原体。年龄分层显示年轻组异常细胞学、hrHPV和STI患病率最高，≥60岁组二次升高，提示自采样在不同年龄组均有潜在应用价值。研究局限性包括：未对所有异常筛查结果进行组织学随访，活检仅选择性进行，不能作为诊断准确性的组织学金标准；单中心、小样本可能限制普适性；仅使用单一LBC系统（PATHPLORER），结果未必通用；实验室基础设施需求可能限制资源有限地区的实施。未来需在多LBC平台的大规模研究中验证此整合式自采样方法。

**研究结论**
使用Earlypap?的单步宫颈自采样是临床医生采样的可靠替代方案，可从单一样本实现整合式细胞学、HPV和STI检测。