摘要
狭叶羽扇豆是一种重要的观赏植物，但由于其对碱性土壤的耐受性较差，限制了其栽培与生产。基于此前在大豆中筛选出的与碱性耐受相关的Gshdz4-GsNAC019-GsEXPA8调控模块，我们利用根癌农杆菌介导的转化技术，在羽扇豆根部过表达Gshdz4-GsNAC019-GsEXPA8（HNE）、Gshdz4-GsNAC019（HN）以及GsNAC019-GsEXPA8（NE）组合，以研究它们对根部发育及碱性耐受性的影响。RT-PCR检测证实所有过表达系均已成功构建。在100 mM NaHCO?胁迫条件下，所有过表达系的萎蔫程度均低于野生型，且存活时间更长，其中HNE系的表型最佳。生理测定结果显示，过表达系的脯氨酸含量、抗氧化酶（SOD、CAT、POD）活性以及根部活力显著高于野生型，而丙二醛含量则更低。叶片的DAB和NBT染色结果表明，其中的O??和H?O?积累量有所降低，说明其抗氧化能力增强。根部结构分析显示，与野生型相比，HNE、HN和NE系的根长、表面积、体积、根尖数量以及分叉数量均有显著增加，其中HNE系的增幅最为明显。生物信息学分析及qPCR检测证实，Gshdz4能够结合并激活内源性的LaNAC072（即GsNAC019在羽扇豆中的同源基因）的启动子，而GsNAC019则能结合并激活内源性的LaEXPA8（即GsEXPA8在羽扇豆中的同源基因）的启动子，从而触发内源性的碱性耐受调控机制。此外，这些过表达组合还显著上调了多种耐碱性胁迫基因的表达，包括LaSOS1、LaNHX6、LaP5CS、LaMYB39以及LaDnaJ1。这项研究为培育耐碱性强的羽扇豆提供了理论依据。
