《Animals》：Habitat Suitability Assessment of Milu (Elaphurus davidianus) in Coastal Wetlands of Jiangsu Province Based on Species Distribution Models
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腹口亚纲（Aspidogastrea）的*Lobatostoma*属（Eckmann, 1932）因形态与分子数据匮乏，其系统学与系统发育关系仍不清晰。在本研究中，研究人员首次对秘鲁东南太平洋沿岸的*Lobatostoma anisotremum*（Oliva
腹口亚纲（Aspidogastrea）的*Lobatostoma*属（Eckmann, 1932）因形态与分子数据匮乏，其系统学与系统发育关系仍不清晰。在本研究中，研究人员首次对秘鲁东南太平洋沿岸的*Lobatostoma anisotremum*（Oliva & Carvajal, 1984）进行了整合鉴定，结合了详细的形态学、超微结构和分子分析。从65条秘鲁石鲈（*Anisotremus scapularis*，Tschudi, 1846）（石鲈科Haemulidae）的肠道中共采集137条标本，感染率为43%，平均丰度为每宿主2.1±3.4条。基于光学显微镜和扫描电子显微镜（SEM）的形态学观察细化了诊断特征，包括体表乳头分布、边缘器官和生殖结构。分子特性方面，研究人员生成了18S rDNA和28S rDNA基因片段的新序列，这是*L. anisotremum*的首个综合性分子数据集。基于18S和28S rDNA数据集的系统发育分析一致地将*L. anisotremum*恢复为*L. manteri*（Rohde, 1973）的姐妹群，在28S分析中得到强支持。相反，*L. kemostoma*（MacCallum & MacCallum, 1913）被恢复为一个独立且明确的谱系，与其他同属物种明显分开，支持了此前关于*Lobatostoma*属非单系性的假说。这些发现还可通过一致的形态差异得到进一步支持，特别是在头叶构型、后体长度和腹盘肺泡数量方面。研究结果还表明，腹口科（Aspidogastridae Looss, 1901）目前的科级和亚科级分类可能未反映演化关系，多盏科（Multicalycidae Gibson & Chinabut, 1984）的嵌套位置以及传统定义的亚科明显的非单系性可佐证这一点。尽管数据支持某些谱系（包括*L. kemostoma*）的独特性，但由于分类单元取样有限且需对该类群进行综合修订，研究人员暂不提出正式的分类学变更。总体而言，本研究强调了整合方法在解决腹口亚纲（Aspidogastrea Faust & Tang, 1936）系统学问题中的重要性，并为未来的分类学和系统发育研究提供了稳健框架。
**论文解读文章**
**研究背景**
吸虫纲（Trematoda Rudolphi, 1808）中的腹口亚纲（Aspidogastrea Faust & Tang, 1936）是吸虫中多样性最低的类群，全球约80种。腹口类虽无显著经济或医学重要性，但其独特的形态（腹侧固着器）、以软体动物为专性宿主、鱼类和龟类为兼性或专性终宿主的单宿主生命周期，以及在吸虫内的基部分类地位，使其具有重要科学价值。然而，由于采样有限和材料稀缺，其系统学长期未解，分类学和系统发育关系存在诸多不确定性。*Lobatostoma* Eckmann, 1932是腹口亚纲中物种最多的属，目前有9个被确认种。其中，*L. anisotremum* Oliva & Carvajal, 1984最初在智利从*Anisotremus scapularis*（石鲈科）肠道中描述，但原始描述缺乏扫描电子显微镜（SEM）下可观察的多个诊断结构细节（如体表乳头数量与分布、边缘器官形状与数量、生殖孔饰纹、劳氏管位置和阴茎形态）。此后对其研究主要集中于地理分布和生态参数，而详细形态学和超微结构研究匮乏。分子数据方面，*Lobatostoma*属的遗传信息稀少且零散，仅三种物种有可用数据；*L. anisotremum*仅有一段414 bp的18S rDNA部分序列，且其他腹口类对该标记的可比数据有限，限制其系统发育推断。因此，需整合更多分子标记以提高分类分辨率，明确*L. anisotremum*在腹口亚纲中的系统发育位置。
**研究内容与结论**
研究人员于2025年3月至9月在秘鲁中部利马埃尔弗龙通岛（12°06′ S, 77°10′ W）捕获65条*A. scapularis*，从肠道中回收137条*L. anisotremum*标本，感染率43%，平均丰度2.1±3.4。通过光镜和SEM进行了形态学与超微结构描述，并首次获取了18S rDNA（1892 bp）和28S rDNA（903 bp）序列。基于贝叶斯推断的系统发育分析中，28S数据集强烈支持*L. anisotremum*与*L. manteri*构成姐妹群（BI=1.00），而*L. kemostoma*作为独立谱系（BI=1.00）位于该分支之外，表明*Lobatostoma*属非单系。18S数据集也得到类似拓扑但支持较弱（BI=0.57）。此外，多盏科（Multicalycidae）的代表种被嵌套在腹口科（Aspidogastridae）内部，使腹口科成为并系；传统定义的亚科（如Aspidogastrinae和Cotylaspidinae）也均非单系。上述结果表明，肺泡行数等传统诊断特征可能不可靠，分类体系需修订，但鉴于取样有限，暂不提出正式变更。该研究强调整合分类学对解决腹口亚纲系统学问题的价值，并为其提供了分子框架。论文发表在《Animals》。
**主要关键技术方法**
研究人员从秘鲁利马埃尔弗龙通岛海域采集65条*Anisotremus scapularis*（宿主样本队列来源），实施系统尸检回收肠道寄生虫。形态学研究采用光学显微镜（铁乙酸洋红染色、水杨酸甲酯透明、加拿大树胶封片）和扫描电子显微镜（SEM，临界点干燥、金溅射镀膜）观察。分子分析从3条标本提取基因组DNA，使用特异性引物通过聚合酶链反应（PCR）扩增28S rDNA和18S rDNA片段，经Sanger法测序。系统发育分析利用贝叶斯推断（MrBayes v3.2），基于NCBI数据库的同源序列构建比对，选择最佳核苷酸替代模型（K80+G和HKY+I+G），运行1,000,000代，抛弃25%老化样本后构建多数规则一致树，以后验概率评估支持度。
**研究结果**
**形态学描述**
基于12条染色标本和3条SEM标本，*L. anisotremum*虫体延长纺锤形，长5.63–9.73 mm，腹盘椭圆形，具3纵隔和56–66横隔，有不显著不规则分布的乳头。边缘器官56–66个，直径32–74 μm。肺泡总计110–130个，分为中央型与边缘型。口部由发育良好的唇（2腹3背）包围，具不规则分布小乳头。前咽部长0.79–1.40 mm，咽肌腺性，肠盲囊单支。睾丸单个近球形，位于体后1/3；阴茎囊梨形；卵巢卵圆形，位于睾丸前；卵黄腺滤泡状，从腹盘中区域延伸至睾丸水平；劳氏管开口于背部后端。卵椭圆形，85–119 μm×45–61 μm。
**分子分析与系统发育**
获得的18S rDNA序列（PZ297966）含2000个比对特征，其中1534保守、397可变、158简约信息位点；28S rDNA序列（PZ297967）含1329特征，650保守、600可变、419简约信息位点。贝叶斯树显示：28S分析中，*L. anisotremum*与*L. manteri*形成完全支持分支（BI=1.00），该支系与*Aspidogaster* spp.支系为姐妹群（BI=0.99）；*L. kemostoma*为独立谱系（BI=1.00），位于该分支之外。18S分析中，*L. anisotremum*与*L. manteri*形成弱支持分支（BI=0.57），该支系与*A. ijimai*为姐妹群（BI=0.98）。多盏科*Multicalyx cristata*（28S）和*M. elegans*（18S）均嵌套于腹口科内部；腹口科中，Rugogastridae基部分支，Cotylaspidinae与Aspidogastrinae均非单系。
**讨论总结**
研究通过整合形态、超微结构和分子数据首次对*L. anisotremum*进行完整鉴定，确认其物种身份并揭示在腹口亚纲中的系统发育位置。28S分析中*L. anisotremum*与*L. manteri*的强支持姐妹关系可能与二者共享短后体、相似头叶构型及太平洋分布有关；而*L. kemostoma*的独立谱系支持*Lobatostoma*非单系，其形态差异（背叶大小不等、后体较长、肺泡数<70）进一步区别于其他种。由于取样有限，暂不提议分类变更。科级层面，多盏科嵌套于腹口科内部提示其作为独立科的系统发育合理性存疑；传统基于肺泡行数的亚科分类亦未得到系统发育支持。未来需扩大取样、补充分子标记并重新评估诊断特征。
**结论**
本研究首次对*L. anisotremum*进行了整合鉴定，细化了其形态与超微结构诊断，并生成了新的18S和28S rDNA序列。系统发育分析一致地将*L. anisotremum*恢复为*L. manteri*的姐妹群，由形态相似性和共同的太平洋分布支持。相反，*L. kemostoma*的独特系统发育位置支持了*Lobatostoma*的非单系性，突显了传统诊断特征的局限性。在更高的分类等级上，多盏科嵌套于腹口科内部以及传统定义亚科的非单系性可能表明肺泡行数等特征并非演化关系的可靠指标。尽管这些发现指向系统学不一致，但在更广泛的分类单元取样和综合形态学重新评估之前，不提出分类学变更。总体而言，本研究强调了整合分类学在探索腹口亚纲内演化关系方面的潜在价值。
