巴西半干旱地区献血者刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)感染的血清学、分子及流行病学调查

《Tropical Medicine and Infectious Disease》：Serological, Molecular, and Epidemiological Investigation of Toxoplasma gondii Infection in Blood Donors from the Brazilian Semiarid Region

　　

摘要：本研究旨在确定巴西半干旱地区(Brazilian Semiarid Region)献血者中刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)感染的患病率及相关危险因素，并探讨其对输血安全(transfusion safety)的意义。研究人员采集了塞阿拉州(Ceará)和帕拉伊巴州(Paraíba)血液中心646名献血者的样本。血清学诊断采用BIOLISA TOXOPLASMOSE ELISA试剂盒检测抗T. gondii IgM和IgG抗体，分子诊断采用常规PCR(conventional PCR)靶向529 bp非编码重复片段。研究人员向献血者发放感染相关变量的流行病学问卷，并采用单因素及多因素阶段（多元logistic回归）进行统计学分析。在646名献血者中，43.4％(281/646)抗T. gondii IgG抗体阳性，0.3％(2/646) IgM抗体阳性，无样本经PCR检出阳性。单因素分析中，年龄、家庭收入、受教育程度、沙拉清洗习惯、饮用水源、生乳摄入及献血年限具有显著性关联；多因素分析仅"年龄"与"沙拉清洗习惯"保持显著。巴西半干旱地区献血者中观察到较高的IgG血清患病率。低IgM频率、伴随IgG阳性及PCR阴性结果与该地区较低的输血传播风险相符。然而应谨慎解释这些发现，因为PCR阴性并不能完全排除循环寄生虫的存在。年龄被确定为危险因素，而正确清洗沙拉具有保护作用。

论文解读：巴西半干旱地区献血者刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)感染的血清学、分子及流行病学调查——基于《Tropical Medicine and Infectious Disease》刊载研究的综述性解读

【研究背景】

刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种专性细胞内原虫(protozoan)，其终末宿主为猫科动物(felids)，可经粪便排出卵囊(oocyst)污染环境，引起人畜共患弓形虫病(toxoplasmosis)。巴西半干旱地区已有报道人群血清阳性率高达66％，该区域旱季卵囊可在12 h内孢子化，具备特有的传播动力学。人类感染多经食入含组织包囊(tissue cyst)的未熟肉类或含孢子化卵囊的污染水、蔬菜传播；此外，处于寄生虫血症(parasitemia)期的感染献血者可通过含速殖子(tachyzoite)的血液成分经输血传播，尤易致免疫功能受抑受血者发生脑炎、脉络膜视网膜炎等严重疾患。巴西血站常规实验室筛查不包含T. gondii检测，且既往巴西献血者T. gondii流行研究稀少并集中于其他气候区，因此有必要明确巴西半干旱地区献血人群暴露水平、危险因素及输血传播风险，为制定控制措施提供依据。本研究由研究人员在塞阿拉州与帕拉伊巴州血液中心开展横断面分析，最终得出结论：该区域献血者T. gondii IgG血清阳性率为43.4％，急性感染(IgM阳性)及PCR检出寄生虫血症均为极低/未检出，输血传播风险低；年龄是独立危险因素，妥善清洗沙拉是独立保护因素。

【主要技术方法与样本队列】

研究人员于2025年8—12月按简单随机抽样估算最低样本量（预期患病率50％、容许误差10％、置信度95％），自巴西塞阿拉州（HEMOCE机构及其Crato、Iguatu、Juazeiro do Norte分中心，共309份）和帕拉伊巴州（Hemocentro da Paraíba及其Cajazeiras、Patos、Sousa分中心，共337份）符合献血资格（18–69岁、体重≥50 kg等）的健康献血者中共采集646份血样及EDTA抗凝血，同时完成结构化流行病学问卷调查。血清学检测采用商品化ELISA（酶联免疫吸附试验，enzyme?linked immunosorbent assay）试剂盒分别测定抗T. gondii IgM与IgG抗体并依厂商临界值判读；分子检测提取白细胞层(buffy coat)基因组DNA，以常规PCR扩增T. gondii基因组中约200–300拷贝的529 bp非编码重复片段（引物TOX4/TOX5），产物经1.5％琼脂糖凝胶电泳验证。流行危险因素分析先进行卡方检验单因素筛选(p≤0.05)，再纳入多元logistic回归(multiple logistic regression)，用GraphPad Prism软件处理并评估共线性与模型拟合。

【研究结果】

3.1. Prevalence of T. gondii in Blood Donors from the States of Ceará and Paraíba, in the Brazilian Semiarid Region

在646份样本中，抗T. gondii IgG抗体阳性率为43.4％(281/646；95％CI：39.6–47.2％)；抗T. gondii IgM抗体阳性率为0.3％(2/646；95％CI：0.04–1.12％)，且该2例同时为IgG阳性；所有样本（含IgM阳性样本）常规PCR均未扩增出529 bp片段，即未检测到寄生虫血症。

3.2. Risk Factors Associated with the Seroprevalence of Anti?T. gondii IgG Antibodies in Blood Donors from the States of Ceará and Paraíba, in the Brazilian Semiarid Region

单因素分析显示年龄(p<0.0001)、家庭收入(p=0.0168)、受教育程度(p<0.0001)、沙拉清洗方式(p<0.0001)、饮用水源(p<0.0001)、生乳摄入(p<0.0001)及献血年限(p<0.0001)与IgG血清阳性显著关联。多因素分析仅"年龄"（OR＝2.26；95％CI：1.86–2.76）为危险因素，"妥善清洗沙拉"（OR＝0.42；95％CI：0.27–0.62）为保护因素。

【讨论与结论总结】

本研究首次报告巴西半干旱地区献血者T. gondii IgG血清阳性率43.4％，与巴西南部和东南部献血人群报道相近，低于巴西湿润热带东北部地区（75％），可能与半干旱高温低湿致环境中卵囊失活较快有关。仅0.3％ IgM阳性且均为IgG共阳，符合献血前筛除急性症状者致近期感染少见的规律；IgM可长期持续且与IgG重叠，单独血清学无法确认活动性感染。所有样本PCR阴性（包括IgM⁺/IgG⁺），与文献一致，反映血中速殖子水平低/间歇及PCR灵敏度局限，提示该区域献血当时活动性寄生虫血症与输血传播可能性低，但不能完全排除免疫功能受抑受血者的潜在风险，研究人员建议对拟用于免疫受损者的血液单位可联合IgG亲和力(IgG avidity)或PCR靶向筛查。单因素多社会人口及行为变量显著，但校正混杂后仅年龄（累积终生暴露.proxy）与沙拉清洗习惯（切断食源性卵囊摄入）独立关联，强调食源性传播及卫生习惯重要性。研究局限性含横断面设计无以确立因果、问卷回忆偏倚、buffy coat PCR检测低水平寄生虫血症灵敏度有限及样本来源于特定半干旱血中心影响外推性。

结论（翻译）：基于本研究结果可得出结论，巴西北东部塞阿拉州与帕拉伊巴州半干旱地区献血者中存在可观的抗T. gondii IgG抗体患病率；抗T. gondii IgM低血清阳性率（且同时为IgG阳性）及经PCR未分子检出病原体，提示巴西半干旱地区经输血传播T. gondii的可能性低，但不能完全排除尤其是免疫功能受抑受血者的传播可能。年龄被确定为血清阳性的危险因素，显著升高感染比值，提示年长献血者经历终生累积暴露于T. gondii；相反，妥善清洗沙拉具保护作用，降低T. gondii感染可能性。