香芍(Xiangshao)颗粒调节多巴胺能突触通路(dopaminergic synapse pathway)改善围绝经期及绝经后中国女性更年期焦虑：一项多中心、双盲、随机对照试验

《Acta Pharmaceutica Sinica B》：Xiangshao granules regulate the dopaminergic synapse pathway and improve menopausal anxiety in peri- and postmenopausal Chinese women: A multi-center, double-blind, randomized controlled trial

　　

摘要：焦虑在围绝经期及绝经后女性中常见，许多常规治疗存在副作用。本多中心、双盲、随机、安慰剂对照试验于2021年12月至2023年6月在中国18个中心开展，纳入360例40?65岁伴更年期焦虑的女性，随机分为香芍颗粒组（高剂量组，n=180）与安慰剂组（极低剂量组，含约9.3%活性提取物，n=180），疗程8周。主要结局为8周后焦虑自评量表(self-rating anxiety scale, SAS)评分减分率，次要结局包括抑郁自评量表(self-rating depression scale, SDS)、改良Kupperman指数(Kupperman Index)及胃肠道症状评分(gastrointestinal symptom score, GIS)。8周后，高剂量组SAS评分减分率高于极低剂量组（37.7% vs. 28.9%，P=0.0052），SAS评分降幅更大，临床改善率更高（69.8% vs. 56.9%，P=0.0151）。SDS、Kupperman指数及GIS组间差异无统计学意义，但两组较基线均有改善。不良事件发生率相当。转录组分析显示香芍颗粒干预后多巴胺能突触通路发生修饰，网络药理学鉴定FOS、ATF2及CREB1为该通路关键靶基因，代谢组学数据佐证上述发现。综上，香芍颗粒安全有效缓解更年期焦虑，可能通过调节多巴胺能信号通路发挥作用。

《Acta Pharmaceutica Sinica B》发表的该项研究针对围绝经期及绝经后女性高发且缺乏理想治疗手段的更年期焦虑问题——现有抗焦虑西药副作用明显、激素治疗对焦虑无效、既往中药机制不清——开展了一项多中心随机双盲安慰剂对照临床试验，并结合外周血转录组学、代谢组学及网络药理学分析与去卵巢小鼠验证实验，探讨香芍颗粒（由白芍、香附、川楝子、柴胡、川芎、枳壳、半夏、豆蔻、木香、甘草组成）缓解更年期焦虑的临床疗效及其对多巴胺能突触通路(dopaminergic synapse pathway)的调控机制。研究人员证实香芍颗粒可显著降低SAS评分且安全性良好，多组学整合分析提示其起效与上调FOS、ATF2、CREB1基因及升高多巴胺代谢物高香草酸(homovanillic acid, HVA)水平、调节多巴胺能突触通路有关，为更年期情绪障碍的中药干预提供了循证依据与分子机制线索。

主要关键技术方法：在中国18家临床中心招募360例40–65岁围绝经期或绝经后伴轻度至中度焦虑（SAS 50–69分）及改良Kupperman指数≥16分女性，按1:1随机接受香芍颗粒或气味匹配的极低剂量安慰剂（含9.3%活性提取物）口服8周，评估SAS减分率等临床指标及不良事件；收集部分受试者基线及8周外周血行RNA测序(RNA-seq)与液相色谱–串联质谱代谢组学(liquid chromatography-tandem mass spectrometry, LC-MS/MS)，筛选差异表达基因(differentially expressed genes, DEGs)与差异代谢物并行KEGG通路富集；从TCMSP数据库获取香芍颗粒组分靶点，与DEGs取交集构建"成分–靶点–通路"网络药理学模型；建立双侧卵巢切除(ovariectomy, OVX)联合慢性束缚应激(chronic restraint stress, CRS)小鼠焦虑模型，灌胃香芍颗粒或安慰剂4周，行开场实验(open field test, OFT)与高架十字迷宫(elevated plus maze, EPM)行为学测试及海马组织RNA-seq验证靶基因表达。

研究结果：

3.1. 基线特征(Baseline characteristics)：360例随机入组（每组各180例），完成率分别为91.7%（高剂量组）与90.0%（极低剂量组），两组年龄、基线SAS（57.2±5.30 vs. 56.6±5.46）、SDS、Kupperman指数、FSH、雌二醇(estradiol, E₂)等基线特征均衡可比(P>0.05)；其中96例纳入多组学亚组分析，基线亦无组间差异。

3.2. 临床症状变化(Changes in clinical symptoms)：①主要结局：8周时高剂量组SAS减分率(37.7±24.74%)显著高于极低剂量组(28.9±27.87%, P=0.0052)，SAS终值更低(44.7±7.94 vs. 47.2±8.79, P=0.0086)，临床治愈（SAS<50分且减分率达标）率更高(69.8% vs. 56.9%, P=0.0151)。②次要结局：4周SAS减分率组间无差异(P=0.6616)；SDS、Kupperman指数、GIS评分两组均较基线显著下降(P<0.0001)但组间无统计学差异(P>0.05)。③不良事件：两组总不良事件率(29.5% vs. 30.8%)、不良反应率(5.7% vs. 6.5%)及严重不良事件相似(P>0.05)，仅高剂量组新发血脂异常略多(4.5% vs. 0.6%, P=0.04)，最常见为胃肠不适与感染。

3.3. 转录组分析：多巴胺能突触通路富集(Transcriptomic analysis: Enrichment of differential genes in the pathways including dopaminergic synapse)：高剂量组治疗后鉴定出526个上调与366个下调DEGs（极低剂量组189上调、400下调），排除共有基因后KEGG富集仅多巴胺能突触通路(dopaminergic synapse, hsa04728)与情绪调节相关，GO富集涉及细胞内钙离子稳态、学习记忆等神经元活动条目。

3.4. 网络药理学分析：揭示靶基因FOS、ATF2、CREB1及多巴胺能突触靶通路(Network pharmacology construction: Revealing the target genes FOS, ATF2, CREB1, and the target pathway——dopaminergic synaptic pathway)：香芍颗粒成分预测靶点(566个)与高剂量组DEGs交集得20个共有基因，KEGG富集Top通路含多巴胺能突触通路；其中FOS（编码c-Fos蛋白）、ATF2（activating transcription factor 2，激活转录因子2）、CREB1（cAMP response element-binding protein 1，环磷酸腺苷反应元件结合蛋白1）位于该通路且在用药后外周血中表达上调，为香芍颗粒活性成分潜在作用靶标。

3.5. 代谢组学分析：多巴胺能突触通路差异代谢物富集(Metabolomic analysis: Enrichment of differential metabolites in the dopaminergic synapse)：高剂量组治疗后差异代谢物KEGG富集示多巴胺能突触通路(P<0.05)与维生素消化吸收通路显著，特征性差异代谢物为高香草酸(homovanillic acid, HVA，多巴胺主要终末代谢产物)与甲萘醌(menadione/vitamin K₃)；多组学联合网络显示FOS、ATF2、CREB1与HVA变化相互关联，极低剂量组未见转录–代谢共富集通路。

3.6. 动物实验验证：多巴胺通路靶基因在小鼠海马表达趋势基本一致(Animal experiment validation: Target genes related to the dopaminergic pathway showed broadly consistent expression changes in the hippocampus of mice)：OVX+CRS小鼠给予香芍颗粒后焦虑样行为减轻，海马组织Fos(P=0.026)与Creb1(P=0.041)表达显著高于安慰剂组，Atf2无显著差异；海马DEGs KEGG富集同样富集于多巴胺能突触通路，GO富集含昼夜节律、G蛋白偶联受体信号等焦虑相关生物过程，与人外周血转录组建模结果呼应。

讨论与结论：研究人员指出本研究首次通过临床–多组学整合策略阐明香芍颗粒缓解围绝经期焦虑的有效性与可能机制——即调控多巴胺能突触通路关键转录因子FOS、ATF2、CREB1及升高多巴胺代谢物HVA水平，弥补了既往中药抗焦虑机制不明的缺憾；同时承认局限性含未涵盖手术绝经或激素使用者、焦虑为量表筛查非精神科诊断、动物与组学亚组样本量偏小、安慰剂含微量活性成分可能低估疗效等。结论(Conclusions)：香芍颗粒安全有效降低围绝经期及绝经后女性焦虑症状，多组学分析提示其治疗作用可能涉及对多巴胺能突触通路的调节，为更年期焦虑的中药治疗提供了临床证据与分子机制新见解，并为后续深入机制研究与药物开发奠定基础。