整合网络药理学(Network Pharmacology)与临床观察阐明扶正消积汤(Yangzheng Xiaoji Decoction, YZXJD)治疗原发性肝癌(Primary Liver Cancer, PLC)的作用机制

《International Journal of General Medicine》：Integrating Network Pharmacology and Clinical Observation to Elucidate the Therapeutic Mechanisms of Yangzheng Xiaoji Decoction in Primary Liver Cancer

　　

背景：原发性肝癌(Primary Liver Cancer, PLC)是全球癌症死亡的主要原因之一。扶正消积汤(Yangzheng Xiaoji Decoction, YZXJD)是基于"扶正祛邪(Fuzheng Xiaoji)"原则组方的传统中药(Traditional Chinese Medicine, TCM)，用作PLC的辅助疗法，但其潜在分子机制尚需进一步阐明。 方法：研究人员通过中药系统药理学数据库(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database, TCMSP)筛选13味中药的活性成分(Oral Bioavailability, OB ≥ 30%；Drug-Likeness, DL ≥ 0.18)。鉴定药物-疾病靶点交集后，使用Cytoscape构建化合物-靶点-疾病网络。进行蛋白质-蛋白质相互作用(Protein-Protein Interaction, PPI)、基因本体(Gene Ontology, GO)及京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG)富集分析。同时，将40例PLC患者按非随机前瞻性对照设计分为常规治疗对照组(n=20)与常规治疗联合YZXJD观察组(n=20)，干预4周。评估生化标志物(甲胎蛋白Alpha-Fetoprotein, AFP；天门冬氨酸氨基转移酶Aspartate Aminotransferase, AST；丙氨酸氨基转移酶Alanine Aminotransferase, ALT；白蛋白Albumin, ALB；凝血酶原时间Prothrombin Time, PT)及中医证候积分。 结果：网络药理学筛选出195个活性化合物及135个潜在治疗靶点。PPI筛选得到25个核心靶点，代谢型谷氨酸受体5(metabotropic glutamate receptor 5, GRM5)、瞬时受体电位阳离子通道亚家族A成员1(Transient Receptor Potential cation channel subfamily A member 1, TRPA1)、α-1D肾上腺素能受体(alpha-1D adrenergic receptor, ADRA1D)、离子型谷氨酸受体AMPA型亚基2(glutamate ionotropic receptor AMPA type subunit 2, GRIA2)及神经肽Y受体2型(neuropeptide Y receptor type 2, NPY2R)连接度最高。GO分析得到215个富集条目，KEGG分析突出14条通路，尤以神经活性配体-受体相互作用(neuroactive ligand-receptor interaction)及cGMP-PKG信号通路显著。临床方面，两组组内AST、ALT及AFP均下降，但在Bonferroni校正阈值(P < 0.01)下，观察组较对照组组间优势最明显体现在凝血酶原时间(PT)——观察组PT改善而对照组恶化。中医证候积分观察组显著降低(P < 0.001)，对照组恶化(P = 0.004)。总有效率观察组80.0% vs 对照组65.0%(P = 0.048)。 结论：网络药理学提示YZXJD可能通过多成分、多通路机制抗PLC。本初步非随机观察中，联用YZXJD与常规治疗相关于肝功能标志物、血清AFP及症状负担的改善。这些发现属假设生成性质；计算预测与临床信号需在充分把握度的随机及实验验证研究中确认后，方可推荐YZXJD常规整合入PLC管理。

论文解读：整合网络药理学与临床观察阐明扶正消积汤治疗原发性肝癌的机制

一、研究背景与目的

原发性肝癌(Primary Liver Cancer, PLC)，尤其是肝细胞癌(Hepatocellular Carcinoma, HCC)，是中国高发且致死率极高的恶性肿瘤。目前西医治疗手段如手术、靶向及免疫疗法常伴随肝毒性与耐药问题。传统中药(Traditional Chinese Medicine, TCM)基于"扶正祛邪(Fuzheng Xiaoji——补气养血、扶助正气以消除瘀毒积聚)"原则治疗PLC具有一定临床基础，扶正消积汤(Yangzheng Xiaoji Decoction, YZXJD)系由黄芪、党参等十三味及以上核心中药组成的复方制剂，前期研究显示其可促肿瘤细胞凋亡，但完整复方的系统药理学基础及配套临床证据尚缺。本研究旨在结合网络药理学(Network Pharmacology, NP)与前瞻性临床观察，揭示YZXJD抗PLC的活性成分、核心靶点、信号通路及初步临床获益，为中西医结合治疗提供科学依据。本文发表于《International Journal of General Medicine》。

二、主要关键技术方法概述

研究人员采用混合方法学设计：①网络药理学部分——从TCMSP数据库筛选YZXJD十三味核心中药口服利用度高(OB≥30%)、成药性好(DL≥0.18)的活性成分并预测靶点，从GeneCards、OMIM、TTD获取PLC相关疾病靶点，取交集后用Cytoscape 3.9.1构建化合物-靶点-疾病网络并做拓扑分析，STRING数据库构建PPI网络筛选核心靶点，DAVID平台做GO与KEGG富集分析；②临床观察部分——纳入贵州中医药大学第二附属医院肝胆胰脾外科2020年9月至2024年12月40例确诊PLC患者，非随机分为对照组(常规西医治疗，n=20)与观察组(常规治疗+YZXJD汤剂，每日3次共4周，n=20)，比较治疗前后肝功能(AST、ALT、ALB)、肿瘤标志物(AFP)、凝血功能(PT)及中医证候积分，统计学处理采用Shapiro-Wilk正态性检验、配对t检验/Wilcoxon符号秩检验、组间变化量比较及Bonferroni校正(P<0.01为显著性水准)。

三、研究结果

Network Pharmacology Findings（网络药理学发现）

—Active Compounds and Targets of YZXJD（YZXJD活性化合物与靶点）：自13味中药筛选出195个符合ADME标准的活性成分，对应1000个预测分子靶点，其中甘草、灵芝、党参贡献成分最多。

—Disease Target Identification（疾病靶点鉴定）：整合三个数据库去重并过滤后获得8735个PLC相关靶点。

—Identification of Potential Therapeutic Targets（潜在治疗靶点识别）：药物靶点与疾病靶点取交集得135个重叠基因；化合物-靶点-疾病网络中连接度最高的前五位化合物为7-acetoxy-2-methylisoflavone、mandelonitrile、astragalopterin、licoisoflavone及7-methoxy-2-methylisoflavone。

—PPI Network Construction and Core Target Screening（PPI网络构建与核心靶点筛选）：STRING构建含134节点、994边的PPI网络，依介数中心性(betweenness centrality, BC)、接近中心性(closeness centrality, CC)及度(degree)大于中位数筛选出25个核心靶点，度值前五为GRM5(degree=50)、TRPA1(degree=44)、ADRA1D(degree=42)、GRIA2(degree=41)、NPY2R(degree=41)。

—GO Functional Enrichment and KEGG Pathway Analyses（GO功能与KEGG通路富集分析）：GO得215个显著条目，生物过程(Biological Process, BP)富集于腺苷酸环化酶抑制型G蛋白偶联受体信号通路、神经肽信号通路等，细胞组分(Cellular Component, CC)定位于质膜及突触部位，分子功能(Molecular Function, MF)富集G蛋白偶联受体活性等；KEGG富集14条通路，最显著为神经活性配体-受体相互作用(neuroactive ligand-receptor interaction)、吗啡成瘾、氮代谢及cGMP-PKG信号通路。

Clinical Observation Results（临床观察结果）

—Comparison of Biochemical Markers and Tumor Indicators Between Groups（组间生化及肿瘤指标比较）：两组组内AST、ALT、AFP均较基线降低；经Bonferroni校正，组间比较仅PT变化量达显著——观察组PT缩短/改善，对照组PT延长/恶化；ALT组间变化趋势倾向观察组但未达校正后显著水平，AST及ALB组间无显著差异。

—Comparison of TCM Syndrome Scores Before and After Treatment（中医证候积分比较）：对照组治疗后积分中位数由5.30升至6.65(P=0.004)，证候加重；观察组由4.95降至3.95(P<0.001)，证候显著改善。

—Comparison of Clinical Efficacy Between Groups（临床疗效比较）：对照组总有效率65.0%(13/20)，观察组80.0%(16/20)，差异具统计学意义(P=0.048)。

四、讨论总结与结论翻译

研究人员指出，核心靶点GRM5、TRPA1等虽多见于神经活性信号，其在肝癌发生中作用尚未明确，可能为肿瘤-神经交互假说的一部分，需实验验证。临床部分显示YZXJD联合常规疗法可改善凝血(PT)、减轻症状、趋势性降低AFP与肝酶，但因样本小、非随机、未设盲及未含长期终点，结论仅为探索性假设生成。局限还包括网络药理仅模拟十三味植物药未含动物/矿物药(牡蛎、鸡内金)，未做体外体内机制确证等。未来需开展多中心随机对照试验(Randomized Controlled Trial, RCT)及多组学机制研究。

结论译文：网络药理学分析显示扶正消积汤(YZXJD)具有多成分、多靶点、多通路特征；初步临床观察提示其在PLC患者中可能改善肝功能、降低AFP水平并调节凝血状态。本研究为YZXJD进一步开发及临床应用提供基础，并凸显中西医结合模式在肝癌等复杂疾病管理中的潜在价值。所提出的机制关联源于计算预测，在得出关于YZXJD分子基础的确定结论前，须通过体外及体内实验加以验证。