后续培养步骤对临床白色念珠菌分离株生物膜形成强度、ALS基因表达以及细胞表面疏水性变异性的影响

《Scientific Reports》：Effect of subsequent passages on biofilm formation intensity, ALS genes expression, and cell surface hydrophobicity variability in clinical Candida albicans isolates

　　

摘要

白色念珠菌是一种机会性酵母病原体，具有多种毒力因子，包括生物膜形成、细胞表面疏水性以及黏附基因的表达。有人担心，反复的实验室传代培养可能会削弱这些特性，从而导致研究结果不准确。本研究的目的是评估多次传代培养对临床分离的白色念珠菌的生物膜形成能力、ALS基因表达以及细胞表面疏水性的影响。10株临床分离的白色念珠菌被进行了多达20次传代培养。我们使用qPCR技术检测ALS1和ALS3基因的表达情况，通过结晶紫试验测定不同传代次数下的生物膜形成程度（P1、P5、P10、P15、P20），并利用水-辛烷分配试验检测不同传代次数下细胞表面疏水性的变化。反复传代培养导致ALS1和ALS3基因的表达逐渐下降（p?<?0.001）。在90%的菌株中，其生物膜形成能力也随之逐渐减弱，而在P20时已有60%的菌株不再能形成生物膜（而P1时仅为10%）。细胞表面疏水性也呈现逐渐下降的趋势，P15时所有菌株的细胞表面疏水性都很低，而初始P1状态时只有40%的菌株如此。反复传代培养会迅速降低白色念珠菌的致病能力，表现为某些关键黏附基因的表达下降、生物膜形成能力减弱以及细胞表面疏水性降低。这些结果凸显了该病原体的可塑性，因此强烈建议在研究中使用传代次数较少的临床分离株，以便更准确地反映其在体内的真实致病性。