《Insects》：Diversity and Host Blood Meal Analysis of Culicoides (Diptera: Ceratopogonidae) from Laos
编辑推荐：
许多库蠓属（*Culicoides* Latreille）的吸血蠓种是重要的害虫和媒介（vectors），能将多种寄生虫传播给人类和其他动物。然而，关于老挝这些吸血昆虫（hematophagous insects）的知识仍然有限，最新的信息报道于四十多年前。在
许多库蠓属（*Culicoides* Latreille）的吸血蠓种是重要的害虫和媒介（vectors），能将多种寄生虫传播给人类和其他动物。然而，关于老挝这些吸血昆虫（hematophagous insects）的知识仍然有限，最新的信息报道于四十多年前。在本研究中，研究人员使用从老挝北部、中部和南部七个省份采集的标本，调查了库蠓的物种多样性、DNA条形码（DNA barcoding）和宿主血源。共收集了4592个标本，包括3095只雌性和1497只雄性。形态学鉴定辅以DNA条形码分析，揭示了26个物种（24个命名种和2个未命名种），包括5个（3个命名种和2个未命名种）新记录种。*Culicoides peregrinus*是最丰富的物种，占25.7%（1179个体），其次是*C. oxystoma*占23.8%（1093个体），以及*C. arakawae*/*C. mahasarakhamense*合计占18.5%（849个体）。DNA条形码分析表明，该遗传标记对老挝库蠓的物种鉴定是有效的。在115条COI（细胞色素c氧化酶亚基I）序列中，103条（89.6%）成功与BOLD数据库中的同种序列匹配。在三个物种中检测到隐性遗传多样性（cryptic genetic diversity）：*C. clavipalpis*、*C. palpifer*和*C. huffi*，分别具有两个、两个和三个分化谱系（divergent lineages）。宿主血餐分析显示，鸡和家养水牛是所调查库蠓物种最常见的血源。这些发现为老挝库蠓的害虫和媒介作用未来研究提供了重要的基线信息。
**老挝库蠓多样性与宿主血源研究解读**
**研究背景与问题**
库蠓属（*Culicoides*）吸血蠓虫是全球重要的害虫和媒介，可传播病毒（如蓝舌病病毒、非洲马瘟病毒）、原生动物（如住白细胞虫、疟原虫）及丝虫等病原体，导致人类（如奥罗普切热、曼森线虫病）及动物（如反刍动物蓝舌病、马属动物非洲马瘟、禽类住白细胞虫病）的严重疾病，造成重大经济损失。然而，老挝的库蠓研究极为有限，距上一次全面调查（Howarth, 1985年）已逾四十年，其间该地区病原传播动态及物种组成可能已发生显著变化。邻国泰国及中老边境（云南）已积累大量研究，但老挝的数据空白威胁着区域公共卫生与畜牧业的联防联控。为此，研究人员系统调查了老挝北部、中部及南部七省的库蠓物种多样性，并首次鉴定其宿主血源，为评估该属的媒介潜能和疾病传播风险提供基线数据。该论文发表在《Insects》期刊。
**主要关键技术方法**
样本采集于2024年8月至2025年10月，覆盖老挝七省22个地点（临近村舍牲口圈），采用CDC灯诱（6台）和扫网法（3人1小时/点）收集标本。形态学鉴定依据现有检索表及翅图集。分子研究选取代表性个体，提取全基因组DNA，扩增线粒体细胞色素c氧化酶亚基I（COI）基因片段（约650 bp）用于DNA条形码分析，通过BOLD数据库比对鉴定物种；扩增细胞色素b（cyt b）基因片段（约300 bp）用于宿主血餐鉴定，通过NCBI BLAST比对（序列相似度≥98%）确定宿主物种。遗传关系采用邻接法（NJ）和最大似然法（ML）构建系统发育树。
**研究结果**
**3.1 物种多样性、丰度与出现率**
通过形态学鉴定结合DNA条形码分析，共识别出26个物种（24个命名种，2个未命名种），其中5个（3个命名种，2个未命名种）为老挝新记录种（如*C. homotomus*、*C. mahasarakhamense*、*C. pampangensis*）。优势种为*C. peregrinus*（25.7%，1179只）、*C. oxystoma*（23.8%，1093只）、*C. arakawae*/*C. mahasarakhamense*（18.5%，849只）及*C. huffi*（15.0%，688只），合计占83.0%。*C. oxystoma*出现率最高（56.7%采样点），其次为*C. actoni*（46.7%）。约89.6%的COI序列（103/115）成功在BOLD数据库实现物种级匹配。在*C. clavipalpis*、*C. palpifer*和*C. huffi*中检测到隐性遗传多样性，分别对应2、2和3个分化谱系（BIN），表明存在未描述的隐种。
**3.2 系统发育关系**
NJ和ML树拓扑一致，显示老挝标本与亚洲其他国家的同种序列聚为高支持率（bootstrap>90%）的单系支。但*C. clavipalpis*（老挝标分属BOLD:AFR5091与BOLD:AGZ1570，遗传距离>3.96%）、*C. palpifer*（最大种内遗传差异16.46%）及*C. huffi*（分属三个BIN）呈现深层分化，指示隐种复合体。
**3.3 宿主血餐来源鉴定**
从97只血餐雌蠓（代表15个物种）中成功测序32只，鉴定出5种脊椎动物宿主。鸡（*Gallus gallus*）为最常血源（66%，21/32），涉及*C. clavipalpis*、*C. guttifer*、*C. mahasarakhamense*和*C. huffi*；家养水牛（*Bubalus bubalis*）次之（22%，7/32），涉及*C. actoni*、*C. hegneri*、*C. parahumeralis*、*C. oxystoma*及*Culicoides* sp. 2；此外在*C. huffi*中检测到斑文鸟（*Lonchura punctulata*）和番鸭（*Cairina moschata*），*C. innoxius*和*C. oxystoma*中检测到牛（*Bos indicus*）。初步显示6个物种偏嗜哺乳动物（哺乳食性），4个偏嗜鸟类（鸟食性）。
**讨论总结与研究结论**
讨论部分指出，本研究是四十多年来老挝库蠓的首次全面报告，新记录的5个物种（如*C. mahasarakhamense*）补充了区域物种名录。DNA条形码证实COI标记对老挝库蠓鉴定高效，但部分隐种（如*C. jacobsoni*可能为形态相似种）和模糊匹配（如*C. innoxius*/*C. sumatrae*）凸显整合分类学的必要性。*C. peregrinus*、*C. oxystoma*等优势种在邻国已被证实携带蓝舌病病毒、利什曼原虫等病原体，提示老挝存在潜在疫病风险。宿主血餐分析首次揭示老挝库蠓主要取食鸡和水牛，与泰国研究部分一致；有限样本显示食性分化，但需更大样量验证。研究结论原文如下：
**结论**：总之，本研究提供了老挝库蠓四十多年来的首次报告。在鉴定的26个物种中，6个为老挝新记录种。DNA条形码揭示了三个物种（*C. huffi*、*C. palpifer*、*C. clavipalpis*）中的隐性遗传多样性，提示存在额外的未描述物种。需要进一步的整合分类学（integrative taxonomic）研究，结合详细形态学分析与额外分子标记以厘清物种界限。宿主血餐鉴定显示，鸡和家养水牛是最丰富物种（如*C. oxystoma*、*C. huffi*、*C. mahasarakhamense*）最常见的血源。这些库蠓物种已知或被考虑为影响家养和野生动物的病原体的潜在媒介。这些发现凸显了在老挝库蠓种群中进一步研究病原体多样性和传播动态的必要性。
