《International Microbiology》：Oral administration of Lactiplantibacillus plantarum 6.2 mitigates acute lung injury via immunostaining of the TLR4/NF-κB pathway and reduction of IL-17 in lung tissue
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背景：急性肺损伤（ALI）是一种损害肺组织并与高发病率和高病死率相关的炎症性疾病。在缺乏有效治疗选择的情况下，针对益生菌等替代性治疗策略的探索日益增强。
目的：本研究考察口服给药的植物乳杆菌（Lactiplantibacillus plantarum）6.
背景：急性肺损伤（ALI）是一种损害肺组织并与高发病率和高病死率相关的炎症性疾病。在缺乏有效治疗选择的情况下，针对益生菌等替代性治疗策略的探索日益增强。
目的：本研究考察口服给药的植物乳杆菌（Lactiplantibacillus plantarum）6.2（Lp62）在小鼠ALI模型中的抗炎潜力。
材料与方法：30只雄性Swiss小鼠（N＝30）被随机分为5组（n＝6）：阴性对照组、健康+Lp62补充组（Lp62组）、ALI组、ALI+Lp62组和地塞米松（Dexamethasone，Dexa）治疗组。Lp62以109 CFU/mL浓度经口灌胃每日给予，持续1周。在麻醉条件下通过鼻内滴注脂多糖（LPS）诱导ALI。24 h后采集肺组织进行大体观察。组织学评价采用苏木精-伊红（H&E）染色，免疫组织化学检测采用抗TLR4、抗NF-κB和抗IL-17抗体。支气管肺泡灌洗液（BALF）总蛋白采用双缩脲法测定，IL-1β采用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测。数据采用单因素方差分析（one-way ANOVA）和Tukey事后检验分析（p＜0.05）。
结果：Lp62降低了BALF中的细胞迁移、蛋白渗出和IL-1β释放，同时减少了肺的大体病变，减轻了组织学炎症细胞浸润并增加了肺泡腔隙；此外，还降低了TLR4、NF-κB和IL-17的活化。
结论：植物乳杆菌（Lactiplantibacillus plantarum）6.2可通过抑制TLR4/NF-κB通路并通过IL-17介导的信号减少中性粒细胞募集，从而成为ALI的一种有前景的治疗策略。
本文发表于《International Microbiology》，围绕益生菌植物乳杆菌（Lactiplantibacillus plantarum）6.2对急性肺损伤（ALI）的干预作用展开。急性肺损伤是一类以肺泡-毛细血管屏障受损、气体交换障碍及强烈炎症反应为特征的综合征，临床上常与较高发病率和病死率相关。现阶段ALI治疗仍以机械通气和支持治疗为主，能够显著降低病死率的特异性药物手段仍然有限，因此开发新的干预策略具有明确现实意义。近年来，益生菌因其免疫调节与抗炎潜力而受到持续关注，尤其是乳杆菌类菌株在炎症性疾病中的作用已逐步得到实验支持。Lp62源自可可自然发酵，既往研究显示其具有耐受胃肠道环境、黏附宿主上皮、抑制病原菌以及调节炎症因子表达等多重益生特性，因此研究人员进一步评估其对ALI的保护作用具有充分依据。
研究人员建立了脂多糖（LPS）诱导的小鼠急性肺损伤模型，以验证口服Lp62是否能够减轻肺部急性炎症反应，并探讨其与Toll样受体4（TLR4）、核因子κB（NF-κB）和白细胞介素-17（IL-17）相关炎症信号的关系。结果显示，Lp62能够显著减轻肺损伤相关病理改变，包括减少支气管肺泡灌洗液中的炎症细胞迁移、降低蛋白渗出和IL-1β水平、改善肺组织大体病变与组织学损伤，并下调肺组织中TLR4、NF-κB与IL-17免疫反应性。这提示Lp62在该实验模型中具有明确的肺部抗炎作用。该研究的重要意义在于，为利用特定益生菌菌株干预ALI提供了实验依据，也为围绕肠-肺轴（gut–lung axis）的炎症调控策略积累了可参考的前期证据，但文中并未直接检测肠道菌群或系统性代谢指标，因此相关机制阐述仍限于肺部局部炎症层面。
在方法学上，研究人员采用雄性Swiss小鼠构建LPS诱导ALI模型，实验动物来源于Federal University of Paraíba。动物随机分为健康对照组、健康+Lp62组、ALI组、ALI+Lp62组和Dexa组。Lp62以10
9 CFU/mL连续灌胃7 d，随后以鼻内滴注LPS诱导肺损伤。24 h后采集BALF和肺组织。主要技术方法包括BALF总细胞计数、双缩脲法蛋白定量、酶联免疫吸附测定（ELISA）检测IL-1β、苏木精-伊红染色观察肺组织病理改变，以及针对TLR4、NF-κB和IL-17的免疫组织化学和组织形态计量分析，统计学采用单因素方差分析结合Tukey事后检验。
在研究结果部分，首先是“Lp62 ameliorates the leukocyte infiltration in LPS-Induced ALI”。该部分通过BALF总细胞计数显示，LPS刺激显著诱导炎症细胞向肺部迁移，而ALI+Lp62组较ALI组细胞迁移量下降约50%，其变化趋势与Dexa组相近。这说明Lp62可有效减轻ALI早期炎症细胞募集，提示其具有抑制肺部急性炎症浸润的能力。
“Protein concentration in the BALF”部分进一步评估肺泡渗出情况。研究显示ALI组BALF蛋白浓度和IL-1β水平明显升高，而Lp62处理后，两项指标均明显下降并接近健康对照水平。由于BALF蛋白升高通常反映肺泡-毛细血管屏障通透性增加及渗出性水肿加重，因此该结果表明Lp62对减轻肺泡屏障损伤和局部促炎环境具有保护作用。
“Macroscopic evaluation of lungs”部分从肺组织大体形态层面评价损伤程度。健康组与Lp62单独补充组肺组织呈现较均一外观，而ALI组可见酒红色、水肿样、不规则病灶。ALI+Lp62组病灶范围明显缩小，颜色更浅，表面更趋均一和平滑；形态计量结果显示其病灶面积较ALI组减少约57%。这一发现说明Lp62不仅能够影响分子和细胞炎症指标，也可在器官整体形态学层面减轻急性损伤。
在“Histological and histomorphometric evaluation of lung”部分，H&E染色证实ALI组存在明显充血、炎症细胞浸润和肺泡开放不足，而ALI+Lp62组与Dexa组肺泡腔隙增大、炎症细胞减少。定量分析进一步显示，ALI+Lp62组肺泡开放面积较ALI组增加约65%，中性粒细胞迁移面积减少约71%。这些结果从组织学角度支持Lp62可改善肺实质结构破坏，保护肺泡结构完整性并减轻中性粒细胞主导的炎症损伤。
“Immunohistochemical evaluation for Toll-like 4”部分聚焦先天免疫识别受体TLR4。免疫组织化学显示，ALI组肺组织中TLR4染色强烈且弥漫分布，主要位于炎症浸润区域；ALI+Lp62组染色强度明显减弱。组织形态计量分析显示，ALI+Lp62组TLR4阳性面积较ALI组降低72.31%。由于LPS主要通过TLR4触发下游炎症信号，该结果提示Lp62可能通过抑制LPS-TLR4识别相关反应来减轻ALI炎症放大过程。
“Immunohistochemical evaluation for NF-κB”部分则分析经典炎症转录调控通路。结果显示ALI组NF-κB免疫染色显著增强，而ALI+Lp62组明显减弱，阳性面积较ALI组下降70.11%。NF-κB是多种促炎细胞因子表达的重要转录因子，因此这一结果与前述BALF炎症指标下降相互印证，说明Lp62对炎症反应的抑制不仅体现在表型层面，也涉及关键信号通路活化的减弱。
“Immunohistochemical evaluation for IL-17”部分评估IL-17在肺组织中的表达。ALI组IL-17染色强烈，ALI+Lp62组明显减弱，阳性面积较ALI组降低76.28%。IL-17与中性粒细胞募集及炎症级联放大密切相关，因此该结果提示Lp62可能通过削弱IL-17介导的局部炎症信号，进一步限制肺组织炎症扩增和损伤进展。
“Levels of IL-1β in the BALF”部分通过ELISA检测可溶性促炎因子。结果表明，LPS诱导后BALF中IL-1β显著升高，而ALI+Lp62组较ALI组下降约33.3%。结合TLR4、NF-κB和IL-17相关结果，可以看出Lp62对肺部炎症反应的调节具有多层次特征，既影响细胞浸润和组织结构，也影响促炎因子和相关信号轴。
讨论部分指出，ALI目前仍缺乏确切有效的药物治疗，支持治疗虽能维持生命，但难以根本逆转炎症损伤，因此寻找新型干预手段十分必要。研究人员认为，Lp62在该模型中表现出的多维度保护作用，为益生菌干预肺部炎症提供了新的证据。文章强调，LPS诱导模型主要反映ALI早期、急性、以中性粒细胞为主的炎症过程，适于观察TLR4介导炎症反应，但不能完全覆盖人类ALI在渗出期、增殖期和纤维化期中的全部病理复杂性。此外，本研究仅使用雄性小鼠，BALF分析限于总细胞计数，未进一步区分不同白细胞亚群，也未扩展检测更多细胞因子或趋化因子；同时未进行肠道菌群、肠屏障通透性或循环代谢物评估，因此不能据此直接推导系统性机制或肠-肺轴的参与程度。即便如此，现有结果仍支持Lp62通过负向调控TLR4–NF-κB–IL-17/IL-1β炎症轴而减轻肺部炎症。
研究结论部分可译为：口服补充植物乳杆菌（Lactiplantibacillus plantarum）6.2可在LPS诱导的ALI模型中减少支气管肺泡灌洗液中的细胞迁移和蛋白渗漏，减轻肺部病变，并维持肺泡结构完整性。与此同时，肺组织中TLR4、NF-κB和IL-17的免疫染色减弱，提示局部炎症激活程度下降。综合来看，Lp62在该实验模型中具有肺部抗炎作用，但其潜在机制及可能的全身性效应仍有待进一步研究澄清。
