《Aquaculture International》：A live-feed hormone delivery protocol for the Siamese fighting fish (Betta splendens): Bioencapsulation of 17α-methyltestosterone in Artemia nauplii
编辑推荐：
暹罗斗鱼（Betta splendens）是一种在全球范围内商业化生产和出口的观赏鱼类。雄性鱼在市场上通常售价更高，使得生产雄性群体的雄性化方案具有经济吸引力。通过饲料添加进行类固醇给药是水产业中最常用的性别逆转方法之一。然而，惰性饲料并不被暹罗斗鱼幼鱼良好接
暹罗斗鱼（Betta splendens）是一种在全球范围内商业化生产和出口的观赏鱼类。雄性鱼在市场上通常售价更高，使得生产雄性群体的雄性化方案具有经济吸引力。通过饲料添加进行类固醇给药是水产业中最常用的性别逆转方法之一。然而，惰性饲料并不被暹罗斗鱼幼鱼良好接受。在此背景下，生物包封技术可能代表一种在早期发育阶段进行口服激素递送的有效替代方案。本研究利用生物包封17α-甲基睾酮（17α-MT）的卤虫属（Artemia sp.）开发了一种暹罗斗鱼的雄性化方案。结果显示，雄性化水平随17α-MT富集浓度的增加而升高，其中30和40 mg·L?1处理组的结果最为一致，性别比例高于0.85，而对照组为0.50。鱼的体重、体长和存活率不受所测试17α-MT浓度的影响。这些结果表明，通过卤虫无节幼体生物包封雄激素类固醇的刺激方式可被视为一种有效且安全的暹罗斗鱼雄性化策略。
暹罗斗鱼（Betta splendens）作为全球主要商业化生产和出口的观赏鱼类之一，其雄性个体因体色更为艳丽、鳍条更大而在市场上具有更高的经济价值，因此开发高效的雄性化技术对于提升商业养殖效益具有重要意义。目前，通过饲料添加类固醇进行性别逆转是水产业中应用最广泛的方法，具有操作简便、易于规模化等优势。然而，暹罗斗鱼存在一系列独特的生物学特性使得传统方法面临挑战：首先，该物种的性逆转敏感窗口期为首次摄食后的40天内，此阶段幼鱼口裂较小，难以有效摄食惰性饲料；其次，早期发育阶段若采用不当的饲料配方，可能导致上皮组织病变、生长受阻及存活率下降等问题；此外，既往研究虽曾尝试使用17α-甲基睾酮（17α-MT）强化的惰性饲料进行雄性化，但高浓度激素往往伴随死亡率上升，且幼鱼对惰性饲料的接受度差。因此，亟需开发适用于暹罗斗鱼早期发育阶段的活体饵料激素递送技术。
研究人员针对上述问题，开展了利用生物包封17α-MT的卤虫无节幼体进行暹罗斗鱼雄性化的研究，旨在建立一种安全有效的早期激素递送方案。该研究成果发表于《Aquaculture International》，证实了生物包封技术在该物种性别调控中的应用价值，为观赏鱼类商业化生产提供了重要的技术参考。
研究采用的关键技术方法包括：（1）卤虫（Artemia）无节幼体的生物包封技术——通过将17α-MT溶解于乙醇后添加至卤虫孵化液，结合不饱和脂肪酸富集试剂进行12小时激素富集；（2）剂量梯度设计——设置0（对照）、5、10、20、30、40 mg·L
?1五个17α-MT浓度梯度；（3）实验动物管理——来源于四个同步孵化集群的暹罗斗鱼幼鱼（孵化后3天开始投喂，实验设计为完全随机区组，每组4个重复，每重复40尾，养殖于8 L水族箱中，水温27.5±1.7 °C，溶解氧5.5±0.5 mg·L
?1，光照周期16L:8D，水处理方式为每小时换水1 L）；（4）雄性化操作流程——激素强化卤虫无节幼体自由投喂40天，随后转用商品饲料（ProBetta
?，粗蛋白37%，粗脂肪…and survival rate; ）。结果与讨论部分还 Updated:的教育能原因 wentlevel
## 研究结果
### 鱼的存活率、体重和体长
各处理组在雄性化操作期（P1，40天）和后续养成期（P2，220天）的存活率未检测到显著差异。P1、P2及总体平均存活率分别为36.98%、61.50%和22.71%，初期死亡率较高。处理组对鱼的体重和体长增长无显著影响，但在17α-MT浓度高于20 mg·L
?1时，体重呈现下降趋势（0.05 < p < 0.10）。所有浓度水平下均未观察到摄食异常现象。值得注意的是，早期高死亡率与激素处理无直接关联，而更多归因于仔鱼开口摄食阶段的固有限难以及从活饵向商品饲料转换过程中的应激反应。
### 性别比例
处理组对性别分布具有显著影响（p < 0.01）。与对照组（性别比例≈0.50）相比，T5、T10、T30和T40组的性别比例显著升高，T20组与对照组及其他处理组均无显著差异。T5、T10、T30和T40组之间未检测到显著差异。多多项分布（Multinomial Distribution, MD）模型分析表明，17α-MT浓度与性别比例呈正相关关系，激素浓度每增加1 mg·L
?1，个体为雌性的优势比降低6.15%。雌性频率受处理显著影响（p < 0.01），但性别未确定个体比例不受处理影响（p = 0.21）。
### 性别与17α-MT浓度的关系
随着17α-MT浓度的增加，雄性比例总体呈上升趋势。T30和T40组表现出最为一致的雄性化效果，性别比例分别达到约0.94–0.95。模型预测方程为y = 1÷(1+e
?0.593?0.063×[17α-MT])，印证了浓度依赖性剂量-效应关系。中等浓度T20组结果出现波动，研究人员认为这可能反映了组间变异而非该浓度下激素无效，原因涉及卤虫富集效率差异、激素在投喂前的保留/流失、自由摄食导致的个体差异摄入，以及性分化敏感窗口期的固有限制等多重因素的复合作用。
## 讨论
研究人员在讨论部分首先肯定了活体饵料生物包封技术在暹罗斗鱼早期雄性化中的有效性。Smoke.和 dose–response patternHowever, Re site and model results supported a clear dose–response.正相关的剂量-效应关系.Regarding the T20 anomaly, intra-replicate variability due to live-prey delivery dispersion was suggested as the primary cause, compounded by enrichment efficiency, hormone leaching, ad libitum feeding, and the narrow developmental window for sex differentiation.竞争抑制雄激素受体及雄激素芳构化现象也被提出作为可能的替代解释.Regarding survival, the absence of a dose-related mortality trend was emphasized as critical, contrasting with previous reports of increased mortality at higher steroid concentrations in other studies.Final growth metrics were interpreted as indicating that the protocol avoids strong size-at-harvest penalties,The downward weight trend at >20 mg·L
?北侧部分the following limitations and future directions: (根据what the, the study acknowledged four main that high early mortality necessitated delayed initiation of enriched feeding; morphological sexing needed histological validation; hormone quantification in Artemia and actual delivered doses remained unmeasured; and long-term assessments of fertility, reproductive performance, and behavior were absent.结论需要进一步措施.)
## 研究结论
卤虫无节幼体生物包封17α-MT被证实为暹罗斗鱼早期摄食窗口期实施雄性化的实用活体饵料递送策略。激素强化卤虫产生了明确且具浓度依赖性的雄性比例增加效应，在测试的最高浓度（30–40 mg·L?1）下，群体雄性率稳定达到约94–95%。17α-MT浓度对终末体重和体长未产生显著影响，存活率亦未表现出一致的浓度相关模式，表明早期阶段损失主要与仔鱼养殖条件限制相关，而非激素暴露本身所致。总体而言，上述发现支持基于卤虫无节幼体的生物包封技术作为适用于外源性营养初始阶段即需激素暴露、且对惰性饲料接受度有限物种的有效方法。未来研究应优化暴露时长与富集水平，以在最大化雄性产出的同时减少激素用量，并评估该方案对性腺发育、繁殖力及行为等方面的潜在长期影响。
